凝胶电泳应用于糖蛋白的分离鉴定.pptxVIP

凝胶电泳应用于糖蛋白的分离鉴定;二维电泳应用于糖蛋白的分离鉴定;目 录;定义;膜蛋白中的糖;膜蛋白分子中的糖;糖蛋白的结构;连接方式;糖基化;糖基化;糖蛋白;糖蛋白的分离纯化方法; ;等电聚焦(Isoelectro focusing IEF);原理 当Pr在电场中迁移到它的PI时，由于净电荷为零，不再移动。 如扩散，附近的凝胶会使其荷电阳、阴极会重新吸引它回到pI位置。因此Pr只能在pI位置被浓缩成窄、稳定的带。称这种浓缩效应为聚焦。 只要凝胶中的pH梯度范围足够窄。便可将pI相近的Pr分开，EF是电泳技术中分辨率最高的技术。;;返回;聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE);电泳过程示意图 A为电泳前3层凝胶排列顺序，3层胶中均有快离子，慢离子 B显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄的区带。 C显示蛋白质样品分离成数个区带。;聚丙烯酰胺凝胶电泳;插入梳子;加缓冲液;电泳;标准Marker蛋白的电泳图谱 ;凝胶电泳;双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离。 第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS）就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状 。 ;;染色