lipofectamine3000说明书分析和总结.docxVIP

lipofectamine3000 protocol 中文版 接种细胞至 70-90%汇合度时转染 使用 Opti-MEM 培养基稀释 Lipofectamine? 3000 试剂(2 管)，充分混匀 使用 Opti-MEM 培养基稀释 DNA，制备 DNA 预混液，然后添加 P3000? 试剂， 充分混匀。 在每管已稀释的 Lipofectamine? 3000 试剂中加入稀释的 DNA (1:1 比例)。 室温孵育 5 分钟。 加入 DNA-脂质体复合物至细胞中。 37℃孵育细胞 2 - 4 天。然后分析转染细胞。siRNA 转染 室温孵育 5 分钟转染 siRNA 至细胞中时，遵循如上所述的DNA 实验方案，但在稀释siRNA 时不要加入 P3000 室温孵育 5 分钟 细胞培养容器 96-well 24-well 6-well 贴壁细胞 1–4 × 104 –2 × 105 –1 × 106 Opti-MEM 培 养 基 稀 释 Opti-MEM 培养基 5 μL × 2 25 μL × 2 125 μL × 2 Lipofectamine? 3000 试 Lipofectamine? 3000 和 μL 和 μL 和 μL 剂（2 管） Opti-MEM 培 养 基 稀 释 Opti-MEM 培养基 10 μL 50 μL 250 μL DNA，制备 DNA 预混液， DNA –5 μg/μL) 然后添加 P3000? 试剂， P3000? 试 剂 (2 μg μL μg μL 5 μg 10 μL 充分混匀 μL/μg DNA) Lipofectamine? 3000 试 稀释的DNA 5 μL 25 μL 125 μL 剂中加入稀释的DNA (1:1 稀 释 的 5 μL 25 μL 125 μL 比例) Lipofectamine? 3000 加入 DNA-脂质体复合物 加入 DNA-脂质体复合物 96-well 24-well 6-well 至细胞中 DNA-脂质体复合物 10 μL 50 μL 250 μL 37°C 孵育细胞 2–4 天。然后分析转染细胞。 表 1：使用lipofectamine 3000 转染 DNA 产品参考用量