生物化学蛋白质之二.pptxVIP

生物化学蛋白质之二;目 录;第3页/共49页;;一、蛋白质的一级结构 ;;第7页/共49页;2. 氨基酸借肽键形成的化合物叫肽，即： ;（二）生物活性肽;;（2）促甲状腺素释放激素：三肽（焦谷氨酰组氨酰脯氨酸），可促进甲状腺素的释放。 ;(5)牛催产素与加压素：均为九肽，含有一对二硫键，两者结构类似。只有第3位第8位不同。;第13页/共49页;2.活性肽来源 （1）体内途径 人体内活性肽绝大多数是从非活性的蛋白质前体经特殊的酶系加工而形成的。 包括：多肽链裂解、酰化、乙酰化和硫脂化等作用。 （2）体外途径 ① 分离、纯化天然内源活性肽 ； ② 化学合成的外源性生物活性肽 ； ③ 生物合成制备活性肽； ④ 酶法水解制取活性肽。 ;3.活性肽的应用 (1) 生物活性肽具有品种多、功能全、应用范围广、高效、无毒副作用等优点，已成为研究和应用开发的热点。 (2) 生物活性肽被应用于食品、医药和饲料等行业。 ;（三）蛋白质的一级结构研究 ;1.获取一定量纯的蛋白质样品，测其分子量，将样品完全水解，确定该蛋白质的氨基酸种类、数目及每种氨基酸的含量。 2.进行末端测定，确定该蛋白质的肽链数目，N-端和C-端是什么氨基酸。 N-末端测定法：常采用2，4—二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。 C-末端测定法：常采用肼解法、羧肽酶法。;3.肽链的拆分:经末端的分析，若该蛋白质含有两条以上的肽链，而且肽链之间是通过非共价键连接，使用蛋白质变性剂将其变性后分开；若蛋白质肽链之间通过共价键相连，则可采取过甲酸氧化法或巯基乙醇还原法将其分开。 4.各肽链中氨基酸排列顺序的测定:使用两种以上的方法将肽链部分水解成肽段，测各肽段的氨基酸顺序，然后使用片段重叠法推测出完整肽链的氨基酸顺序。 5.确定二硫键和酰胺的位置 ;二、蛋白质的二级结构(secondary structure) ;（二）蛋白质的二级结构;（1）肽链空间构象的基本结构单位为肽平面或肽单位。肽平面:指肽链中从一个Cα原子到另一个Cα原子之间的结构，共包含6个原子,共处于同一个平面。;（2）肽键上的原子呈反式构型; （3）肽键C-N键长为0.132nm,比一般的C-N单键短，比C=O双键要长，具有部分双键的性质，不能旋转。而?Cα-COOH、C-NH2，为真正单键，可以旋转; (4) 相邻肽平面构成二面角：一个肽平面围绕N1-Cα(氮原子与α—碳原子)旋转的角度，用Φ表示。另一个肽平面围绕Cα-C2(α-碳原子与羧基碳)旋转的角度，用Ψ表示。这两个旋转角度叫二面角(dihedral angle)。 ;第23页/共49页;2.蛋白质二级结构主要类型有:α-螺旋、β-折叠、β-转角;第25页/共49页; α-螺旋在许多蛋白中存在，如α-角蛋白、血红蛋白、肌红蛋白等，主要由α-螺旋结构组成。;第27页/共49页;* 影响α-螺旋稳定的因素： ;(2) β-折叠(β-pleated sheets)又称β-片层，其结构要点如下：;第30页/共49页;(3) β-转角:指蛋白质的多肽链在形成空间构象时经常会出现180。的回折; 一般由四个连续的氨基酸组成;第一个氨基酸的羧基与第四个氨基酸的氨基形成氢键;第二个氨基酸残基常为Pro。;第32页/共49页;第33页/共49页;（二）超二级结构和结构域;第35页/共49页;2．结构域（structural domain）;第37页/共49页;第38页/共49页;??三.蛋白质的三级结构 ;第40页/共49页;第41页/共49页;第42页/共49页;?四.蛋白质的四级结构;第44页/共49页;第45页/共49页;第46页/共49页; 三级结构形成后，蛋白质生物学活性必需基团靠近，形成活性中心或活性部位，即蛋白质分子表面形成了某些发挥生物学功能的特定区域。;生物化学;感谢观看！