工学培养基及培养基灭菌设备.pptxVIP

工学培养基及培养基灭菌设备;一、培养基概述;（二）培养基准备及要求;2.动物细胞培养基： ①天然培养基：实验室 ②合成培养基：工业 ③无血清培养基：工业 灭菌：微孔滤膜过滤除菌 3.植物细胞培养基： 组分：无机盐类，碳源，维生素，植物生长激素，有机氮源，有机酸等 灭菌：115-120℃，保持15~20min 微孔滤膜过滤除菌 ;二、培养基灭菌;4、灭菌的方法 ①化学灭菌： ②射线灭菌： ③干热灭菌法： 常用于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。 ④过滤灭菌： 微孔滤膜过滤除菌；大多用于热敏性物料 ⑤湿热灭菌： 121℃，保持20~30min ;5、湿热灭菌原理 （1）原理： 蒸汽在冷凝时释放出大量潜能，并且具有强大穿透力，在高温和水存在时，微生物细胞中的蛋白质极易发生不可逆凝固性变性，致使微生物在短时间内死亡。 湿热灭菌的效果，取决与致死温度和致死时间。;（2）微生物热死规律----对数残留定律 培养基中微生物受热死亡的速率 与残留的微生物数量成正比。 式中N：表示培养基残留的活菌数,个 t：受热时间，min 　 　　　 K：反应速度常数（比死亡速率），min-1 　　 K=f(灭菌温度、菌种、培养基等) 将对数残留定律的积分形式变换为： 式中 N0：开始灭菌时原菌数，个； 　　 Nt：经时间t后残留菌数，个； k：意义同上 t ：表示理论灭菌时间;(3)培养基灭菌温度的选择 灭菌温度的选择应考虑的因素主要有：a.微生物的热致死温度：应高于该温度，通常以芽孢为准。 b.营养成分的破坏 灭菌温度的选择，应是在保证灭菌效果的前提下，尽可能减少培养基中营养成分的破坏。 高温短时灭菌;4、影响培养基灭菌的因素 影响培养基灭菌的因素除了所污染杂菌的种类、数量、灭菌温度和时间外，还有： 1.培养基成分 2.pH值 3.培养基中颗粒 4.泡沫 ;三、培养基工业灭菌及设备;3、分批灭菌的操作过程：（书P5） 全过程包括升温、保温、降温三个过程。 三路进汽：蒸汽从空气管道、取样管和出料管进入罐内直接加热??直到所规定的温度，并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进汽”。 注：凡是与培养基接触的管道都要进汽；凡是不与培养基接触的管道都要排汽;操作要点： ①加培养基，密封发酵罐，慢速搅拌； ②夹套通蒸汽，培养基预热至75-90℃,停止搅拌； ③进三路蒸汽，同时微开对应排气阀，排冷凝水； ④调进汽阀，排汽阀保持罐压，在一定温度下（121℃），保温20-30min ⑤灭菌完毕后，先关一路排汽阀，再关一路进汽阀，至三路排汽、进汽阀全关闭； ⑥通无菌空气； ⑦夹套通冷凝水，冷却培养基;（二）连续灭菌（连消） 1、概念： 培养基在发酵罐外经过一套灭菌设备连续的加热灭菌，冷却后送入已灭菌的发酵罐内的工艺过程称为连续灭菌。 空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、还是尿素（或液氨）罐、消泡罐，当培养基（或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，称为空罐灭菌。 2、优缺点： 优点：可采用高温快速灭菌工艺；发酵罐非生产占用时间缩短，容积利用率提高；热能利用率合理，适于自动化控制 缺点：不适合高粘度的培养基的灭菌；染菌可能性增高;3、连续灭菌过程及设备 设备流程图： 配料罐→送料泵→预热罐→连消泵→加热器→维持罐→冷却器→发酵罐 （1）加热器 塔式加热器：书P11 喷射加热器：书P12;（2）维持罐：书P13 灭菌系统中的维持设备，主要是使加热后的培养基在维持设备中保温一段时间，以达到灭菌的目的，也称保温设备。 （3）冷却设备：书P17 真空冷却器：当高温培养基进入真空冷却器后，在真空下，水分立即汽化，使培养基本身温度下降，达到冷却目的。 喷淋冷却器：喷淋冷却器是将水通过喷淋装置均匀地淋在水平的排管上，以冷却管内的培养基。 ;感谢观看！