动力学分光光度法的基本原理及测定方法.pdfVIP

动力学分光光度法的基本原理及测定方法 动力学分光光度法是利用反应速率与反应物，产物，催化剂浓度间的定量关 系，通过测量吸光度对被测组分定量的一种方法。下面测定反应体系中催化浓度为例， 介绍动力学分光光度法的基本原理及测定方法。 设一个在催化剂（F）的作用下进行的显色反应： 若 D 为有色化合物，则 D 的生成速率（显色反应速率）可表示为： 在反应进行的初期，A,B 的浓度较大，反应小号的 A 和 B 可忽略不计，则可视 为常数： 由CF 变化也很小，可视为常数，上式积分得： 将上式代入朗伯比尔定率，有： 此式即为动力学分光光度法的基本关系式。 测定催化剂（F）的方法通常有固定时间法，固定浓度法和斜率法三种，固定 时间发是让反应进行一固定时间后终止，然后测量反应体系的吸光度（A）: 不同的催化剂浓度 (cF)测得相应反应体系的 A 值，做出校准曲线，然后由加 入试样的反应体系的 A 值求出试样中 F 的浓度。 固定浓度法是测量产物(D)达到一定浓度所需的时间，此时式中的 CD 为常数， 则： 同样地可以作出校准曲线，由试样体系的 t 值求出催化剂（F）的含量。 斜率法是根据吸收光度(A)随反应时间的变化速率来测定CFO根据关系在不同 的 CD 下测得 A-t 曲线，分别求出其斜率值。作出 KCF-CF 校准曲线。斜率法的校准曲 线由更多的实验数据获得，因而其准确度较高。 1 动力学分光度法具有灵敏度高，选择性好，应用范围较广等等特点，主要缺 点是影响因素多，不宜严格控制，测定的误差较大。 2