细胞生物学教程 细胞骨架.pptxVIP

细胞生物学教程 细胞骨架;The three types of protein;第一节 微丝 microfilament , MF;第4页/共63页;根据等电点分为3类：α分布于肌肉细胞；β和γ分布于肌细胞和非肌细胞。 actin单体外观呈哑铃形，称球形肌动蛋白G-actin；多聚体称为纤维形肌动蛋白F-actin。 actin在进化上高度保守，酵母和兔子肌肉的肌动蛋白有88%的同源性。 肌动蛋白要经过翻译后修饰，如N-端乙酰化或组氨酸残基的甲基化。;条件：ATP、适宜的温度、存在K+和Mg2+离子。 过程：2-3个actin聚集成一个核心（核化）；ATP-actin分子向核心两端加合。微丝具有极性，ATP-actin加到(+)极的速度要比加到(-)极的速度快5-10倍。 溶液中ATP-肌动蛋白的浓度处于临界浓度时，ATP-肌动蛋白在(+)端添加，而从(-)端分离，表现出 “踏车”现象。;Treadmilling;细胞中大多数微丝结构处于动态的组装和去组装过程中，并通过这种方式实现其功能。 细胞松弛素（cytochalasin）可切断微丝纤维，并结合在微丝末端抑制肌动蛋白加合到微丝纤维上，特异性的抑制微丝功能。 鬼笔环肽（phalloidin）与微丝能够特异性的结合，使微丝纤维稳定而抑制其功能。荧光标记的鬼笔环肽可特异性的显示微丝。 ;二、微丝结合蛋白;核化蛋白;第11页/共63页;第12页/共63页;第13页/共63页;三、肌肉的组成;第15页/共63页;Sarcomere;（一）肌球蛋白（myosin）;Myosin II structure;第19页/共63页;（二）原肌球蛋白（tropomyosin.Tm） 每个Tm的长度相当于7个肌动蛋白，呈长杆状。组成两条平行纤维，位于肌动蛋白双螺旋的沟中，主要作用是加强和稳定肌动蛋白丝，抑制肌动蛋白与肌球蛋白结合。 （三）肌钙蛋白（troponin,Tn）， 含三个亚基，肌钙蛋白C特异地与钙结合，肌钙蛋白T与原肌球蛋白有高度亲和力，肌钙蛋白I抑制肌球蛋白的ATP酶活性，主要作用是调节肌肉收缩。 ;Tropomyosin, actin and troponin;（四）肌肉的收缩 ;Myosin movement (continued);四、微丝的功能;培养的上皮细胞中的应力纤维（微丝红色、微管绿色） ;2．形成微绒毛。 3．细胞的变形运动。 ;4. 胞质分裂； 5. 顶体反应； 6. 其他功能：抑制微丝的药物（细胞松弛素）可增强膜的流动、破坏胞质环流。 ;第二节 微管 Microtubule, MT;A fluorescently stained image of cultured epithelial cells showing the nucleus (yellow) and microtubules (red);第30页/共63页;微管是由13条原纤维构成的中空管状结构，直径22~25nm。 每一条原纤维由微管蛋白二聚体线性排列而成 微管蛋白二聚体由结构相似的α和β球蛋白构成。 α球蛋白结合的GTP从不发生水解或交换。 β球蛋白也是一种 G蛋白，结合的GTP可发生水解，结合的GDP可交换为GTP。;第32页/共63页;微管具有极性，(+)极生长速度快，(-)极生长速度慢。 (+)极的最外端是β球蛋白，(-)极的最外端是α球蛋白。 微管和微丝一样具有踏车行为。 微管形成的有些结构是比较稳定，是由于微管结合蛋白的作用和酶修饰的原因。如轴突、纤毛、鞭毛。 大多数微管处于动态组装和去组装状态（如纺锤体）。 秋水仙素、长春花碱抑制微管装配。 紫杉酚能促进微管的装配, 并使已形成的微管稳定。;The function of GTP-tubulin cap;Microtubule disassemble when ADP-tubulin are exposed ;MAP分子至少包含一个结合微管的结构域和一个向外突出的结构域。突出部位伸到微管外与其它细胞组分（如微管束、中间纤维、质膜）结合。 主要功能：①促进微管组装。②增加微管稳定性。③促进微管聚集成束。;三、微管组织中心microtubule organizing center, MTOCs;中心体由两个相互垂直的中心粒构成。周围是一些无定形物质，叫做外中心粒物质（PCM）。 中心粒由9组3联微管构成，具有召集PCM的作用。 MTOC处微管蛋白以环状的γ球蛋白复合体为模板核化、先组装出（-）极，然后开始生长。 提纯的微管，在微酸性环境，适宜的温度，存在GTP、Mg2+和去除Ca2+的条件下能自发的组装成11条原纤维的微管。;第39页/共63页;The Orientation of Microtubules in a Cell ;