DNA的三级结构课件.pptxVIP

DNA的三级结构课件;负超螺旋 ;超螺旋DNA的性质 ;2．开环DNA（open circular DNA, ocDNA）;;3．连环DNA（Catenanes DNA） ;第7页/共100页;1．重复序列 （repeated sequence ） ;主体DNA（bulk DNA） ;第10页/共100页;（2）中度重复序列（moderately repeated sequence） ;2．回文结构（palindromic structure） ;(2) 发夹形和十字形;（一）RNA的类别 ;4．其它类别的RNA ;（二）RNA的一级结构 ;2．RNA分子中核苷酸的排列顺序 ;3．几类RNA的一级结构 ;（2）rRNA的一级结构 ;真核生物核糖体 ;第21页/共100页;（3）mRNA的一级结构 ;5′-cap的功能 ;3′-polyA : polyA的残基数20~200个，或更多。;RNA前体 ;（三）RNA的二级结构 ; RNA中双螺旋结构稳定的因素主要是碱基堆积力，其次是氢键。 ;1．tRNA的二级结构 ;第29页/共100页;第30页/共100页;X光晶体衍射解出的 tRNA 立体结构;第32页/共100页; 1980年牛心线粒体tRNAser只有63个核苷酸，沉降常数3S，缺少D环和D臂，呈二叶草型。;2．rRNA的二级结构 ;第35页/共100页;第36页/共100页;3．mRNA的二级结构 ;（四）RNA的三级结构 ;六、核酸酶类;（二）核糖核酸酶类 ;2．核糖核酸酶T1（ribonuclease T1，简称RNase T1） ;3．核糖核酸酶T2（ribonuclease T2，简称RNase T2） ;（三）脱氧核糖核酸酶 ;2．牛脾脱氧核糖核酸酶 （spleen deoxyribonuclease, 简称DNase II） ;3．限制性内切酶（restriction endonuclease） 简称限制酶 ;（1）限制性内切酶的特征 ;（2）限制性内切酶的命名 ; （3）限制性内切酶举例 ;第49页/共100页;（四）非专一性核酸酶类（nonspecific nuclease） ;蛇毒磷酸二酯酶对末端磷酸基有严格的要求 ;橘青霉磷酸二酯酶专一性： 与蛇毒磷酸二酯酶相同 ;2．牛脾磷酸二酯酶 ;（五）磷酸单酯酶 ;（一）一般性质：分子大小、性状、溶解度。 ;（二）粘度 ;1．紫外分光光度法 ;2．摩尔磷消光系数（molar absorptivity）法 ;3．增色效应与减色效应 ;（五）沉降特性 ;第61页/共100页;用1～2个已知浮力密度的标准DNA样品作参考 ;2．DNA中G-C含量的测定 ;3．核酸的构象和分离 ;（六）核酸的变性、复性和杂交 ;（1）热变性 ;（2）熔点（Tm） ;（3）影响Tm值的因素 ;2．复性（renaturation） ;（2）影响复性的因素 ;（3）复性动力学 ;Cot : ;3．杂交（hybridization） ;用硝酸纤维素膜作为支持物进行杂交 ;1977年G.K.Stark首创Northern blotting （Northern印迹） ;（七）凝胶电泳 ;凝胶电泳兼有分子筛效应和电荷效应 ;（一）DNA的生物功能 ;① 细菌转化作用 （transformation ）;1944年Avery细菌转化实验 ;② 噬菌体感染实验 ;第82页/共100页;③ 转导作用（transduction） ;3. DNA与遗传性疾病、癌变的关系;（二）RNA的生物功能 ;（2）tRNA的作用 ;tRNA怎样识别mRNA上相应的密码子 ;（3）rRNA的作用 ;九、核酸的分离、纯化和核苷酸的制备 ;抑制DNase： ;（二）大分子DNA的提取 ;3．DNA-蛋白质（DNP）的提取 ;4．去蛋白质 ;5．沉淀DNA ;（三）RNA的提取 ;4．工业上制备RNA ;（四）核酸纯度鉴定 ;（五）核酸含量的测定 ;（六）核苷酸的制备 ;感谢观看！