基因调控及遗传发育.pptxVIP

基因调控及遗传发育;一、细胞质在细胞生长和分化中的作用;第3页/共41页;第4页/共41页;第5页/共41页;二、细胞核在细胞生长和分化中具有主 导作用 ;三、细胞核和细胞质在个体发育中的相互依存 ; 果蝇极细胞质移植试验： 小麦瘿蚊染色体的放弃： 水蜡虫体细胞染色体异染色质化： 细胞质对性染色体的影响：;第二节 细胞的全能性;第三节 基因调控;一、 基因调控的证据;第12页/共41页;第13页/共41页;二、 原核生物基因调控特点;正调控和负调控：存在细胞中的阻遏物阻止转录过程的是负调控(negative regulation)。阻遏物与DNA分子结合，阻碍RNA聚合酶转录，使基因处于关闭状态。只有当阻遏物被除去之后，转录才能起动，产生mRNA分子。正调控(positive regulation)是经诱导物诱导转录的调控机制。在正调控系统中，诱导物通常与另一蛋白质结合形成一种激活子(activator)复合物，与基因启动子DNA序列结合，激活基因起始转录。 ;三、乳糖操纵元模型 ;1 负调控;2 正调控;3、乳糖操纵元存在的证据 ;阻遏蛋白的分离与鉴定： 1966年吉尔伯特(Gilbert，W.)等人利用一种阻遏蛋白超量突变型(regulator quantity，Iq)，分离出阻遏蛋白。这种突变型产生的阻遏蛋白是野生型的10倍。经IPTG诱导Iq细胞，分离提取的阻遏蛋白放在透析袋中，用含有同位素标记的IPTG溶液透析。在这种透析条件下，标记的IPTG小分子可以自由地扩散进入透析袋内，当达到平衡时，透析袋内的IPTG浓度高于透析袋外溶液的浓度，说明袋内的细胞提取物中含有与IPTG结合的物质，这种物质的分子量大而不会扩散到透析袋外面的溶液中。将与IPTG结合的物质纯化后的分析表明，它具有蛋白质的特性，而来自I— 细胞的提取物则没有与IPTG结合的特性，说明分离的是阻遏蛋白。;进一步将细菌放在含有同位素标记的培养基中培养，分离出与IPTG结合并经同位素标记的阻遏蛋白，再与带有lac O+序列的Lambda DNA混合，分析沉降系数。DNA的沉降系数为40S，而IPTG——阻遏蛋白复合物的沉降系数为7S。将IPTG阻遏蛋白复合物与DNA混合后用梯度超速离心沉降分离，发现具有放射性的蛋白质复合体的沉降系数与DNA的相同，说明阻遏蛋白已经与DNA结合了。而且，分离的这种阻遏蛋白只能与正常的lac操纵子序列结合，不能与lac操纵子组成型突变(Oc)DNA结合。 ;阻遏蛋白的结晶分析： 1996年，刘易斯(Lewis，M)等人成功地测定了阻遏蛋白的结晶结构，以及阻遏蛋白与诱导物及操纵子序列结合的结构，进一步补充和证实了根据遗传和生化分析提出的lac操纵元结构模型，从而使lac操纵元调控得到充分的证据，成为一幅完整的图案。I基因产物具有360个氨基酸，它的单体与诱导物结合的位点已经鉴定。分析表明，具有功能的阻遏蛋白含有4个亚基，即为同聚四聚体。四聚体可被蛋白酶酶切，产生5个片段，其中4个来自四聚体的氨基端，它们负责与操纵子DNA结合。第5个是四聚体形成的中心，来自羧基端，它与乳糖诱导物及IPTG结合。每个四聚体可同时与两个对称的DNA双链结合 。;;四、真核生物基因表达的调控; 短期调控:对环境条件的改变或者细胞的及组织的生理条件的改变作出反应。 长期调控:受到内在程序化的控制,和外界环境的变化关系不大。 基因的活性是指具有表达的基本条件。 基因的表达是指具备表达的充分条件;;2 真核生物基因题调控的3个问题:;3.3 真核生物基因调控的信号:; 细胞间的接触和作用也有基因调控作用;4 真核生物基因题调控的不同水平:; 酵母的变配型的转变 酵母的变配型;等位排斥 有效重排 印迹基因 类别转换; 抗体有100万种以上，一种淋巴细胞只产生一种抗体。 指令学说： 克隆选择学说： 体细胞重组学说： ;第34页/共41页;第35页/共41页;第36页/共41页;转录水平的调控： 调控元件 调控方式;异染色质化 水蜡虫（2n=10）在体细胞里来自父本的5条染色体依次被异染色质化，在精子形成时丢失，只保留来自母本的5条染色体。 剂量补偿 雌性哺乳动物X染色体的失活; 莱昂假说： 巴尔小体是一个失活的X染色体，失活的过程就称为莱昂化； 在哺乳动物中，雌性个体细胞中的两个X染色体中有一个X染色体在受精后的第16天（受精卵增殖到5000-6000，植入子宫壁时）失活； 两条X染色体中哪一条失活是随机的； X染色体失活后，细胞继续分裂形成的克隆中，此条染色体都是失活的； 生殖细胞形