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紫外分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐含量 蔬菜是一个容易收集亚硝酸盐的蔬菜，尤其是叶子蔬菜。人体所需的亚硝酸盐含量为81.2%。 本文采用紫外可见分光光度法测定了济宁市市售蔬菜亚硝酸盐的含量, 取得了较为满意的结果。 1 相对标准偏差的测定 试验材料:所用蔬菜均购自济宁市区各农贸市场, 共4种, 分别为生菜、小白菜、油菜、菠菜。 仪器与试剂:高速组织捣碎机;754型紫外分光光度计;电子天平;恒温水浴锅。 亚硝酸盐标准液:准确称取在硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠0.4926g溶于水中, 定容至1000mL容量瓶中, 配制成浓度为100mg/LNO 所用试剂均为分析纯, 所用水为超纯水。所有实验用玻璃仪器均彻底洗净, 并用超纯水冲洗, 以确保无硝酸根离子和亚硝酸根离子存在。 操作方法:将样品洗净, 匀浆, 称取5.0g匀浆液于烧杯中, 加50mL水, 用氢氧化钠溶液调节至偏碱性, 再用水将样品全部转移至250mL容量瓶中, 置于60℃水浴加热10min, 取出后冷却至室温, 加水至刻度, 混匀。静置30min, 上清液经乙酸锌和活性炭混合物过滤 亚硝酸盐标准曲线:准确吸取标准储备液0.0, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0mL, 置于25mL容量瓶中, 然后分别加入2mL 0.4%对氨基苯磺酸, 混匀, 静置3~5min, 再加入1mL 0.2%盐酸萘乙二胺, 于波长530nm下测定吸光度并计算出回归方程。 样品测定:吸取10.0mL上述滤液, 按上述方法操作, 同时做试剂空白。 准确度和精密度:对上述试样分别进行7次测定, 得到相对标准偏差分别为3.25%、4.38%、3.11%、3.92%;同时于样品中进行加标回收试验, 其平均加标回收率分别为95.2%、98.5%、93.7%、98.6%。 2 测定波长为工作波长,方法在样品测定测定未充 工作曲线及相关系数:按照实验方法, 改变 NO 样品检测结果:按照实验方法测定蔬菜中亚硝酸盐含量, 结果见表1。 最大吸收波长的选择:配制不同体系的溶液, 在520~560nm波长范围测定吸光度, 在优化实验条件下进行波长扫描, 测得在530nm处有最大吸收, 故本实验选530nm为工作波长。 对氨基苯磺酸的配置方法对实验结果的影响:据国家卫检标准GB/T5009.33~96, 将其溶于 700ml水和300ml冰乙酸中, 需加热才能溶解, 且室温保存时, 有晶体析出;而 GB/T5009~2003将其溶于20%盐酸中, 无需加热即可溶解, 且室温保存时, 无晶体析出。经过对比, 择取后者效果较好。 色素和抗坏血酸对实验结果的影响:实验表明, 色素和抗坏血酸影响比色效果, 为消除干扰, 实验采用在样品提取时加入醋酸锌和活性炭, 提高了测定的灵敏度和准确性。