哈尔滨工程大学《微生物学》课件-第7-8章免疫诊断与预防.pptVIP

免疫抑制剂：是一类抑制机体免疫功能的生物或非生物制剂。 常见免疫抑制剂种类 分 类 举 例 抗生素 环孢霉素A、FK-506 单克隆抗体制剂 抗TC及亚群、抗MHC、抗IL和IL受体 激素 糖皮质激素 烷化剂 环磷酰胺 抗代谢药 硫唑嘌呤、5-氟尿嘧啶 2、免疫抑制剂 第八章 消毒与灭菌 消毒与灭菌有关的常用术语 消毒：指杀死环境或物品上病原微生物，但不一定能杀死芽胞和非病原微生物。用作消毒的药品成为消毒剂。 灭菌：是指杀灭物体上所有微生物，包括繁殖体和芽胞。 抑菌：抑制人体体内或体表细菌生长繁殖的方法。常用的抑菌剂为抗生素。 防腐：是指体外防止或抑制微生物生长繁殖，防止物品变 质的方法。用于防腐的药品叫防腐剂。使用同一化学药品在高浓度为消毒剂，低浓度时为防腐剂。 无菌：物品中没有活的微生物存在。常指灭菌后的状态。 无菌操作:防止微生物进入人体或物品中的操作方法。 消毒、灭菌的方法一般可分为： 热力灭菌法 辐射杀菌法 物理学方法 滤过除菌法 超声波杀菌法 干燥和低温抑菌法等 化学方法 * 第七章 免疫学诊断与预防 第一节 免疫诊断 一、抗原与抗体的检测 二、淋巴细胞的测定 三、诊断方法的应用 第二节 免疫防治 一、免疫学预防 二、免疫学治疗 哈尔滨工程大学《微生物学》 第一节 免疫诊断 一、抗原与抗体的检测 1、抗原抗体反应的特点： 特异性 可逆性 比例性 阶段性 一、体外免疫学检测 1、抗原抗体反应的特点： 特异性、可逆性、比例要适宜 抗体过剩 比例适当 抗原过剩 抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系 2、常见检测法 （1）凝集反应 间接凝集和间接凝集抑制试验 （2）沉淀反应 单向琼脂扩散试验 双向琼脂扩散试验 对流免疫电泳 - + （3）补体结合反应 补体结合反应 （4）免疫标记技术 免疫荧光直接法 免疫荧光间接法 a、免疫荧光技术 b、免疫酶技术 1、包被抗体 洗 2、加抗原 洗 3、加酶标抗体 洗 4、加底物显色 1、包被抗原 洗 2、加抗体 洗 3、加酶标抗 球蛋白 洗 4、加底物显色 ELISA双抗体夹心法 ELISA间接法 C 放射免疫测定法（RIA） 放射免疫测定法（RIA）是将放射性核素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫标记技术。 D：免疫印迹法：Western印迹法 (1)外周血单个核细胞的分离 采用葡聚糖－泛影葡胺（分离液）密度梯度离心法 （二）淋巴细胞检测 一、淋巴细胞的类别鉴定 (2) 淋巴细胞亚群的分离 尼龙棉分离法 E花环分离法 洗淘法 流式细胞术 是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。 磁分离技术 流式细胞仪的工作原理 光学系统 激光光源 光收集系统 液流系统 流动室 液流驱动系统 电子系统 光电转换 数据处理系统 细胞分选系统 二、淋巴细胞的功能测定 T细胞功能测定 增殖试验 3H－TdR掺入法 MTT法 细胞毒试验 皮肤试验 以特异性抗原或有丝分裂原注入皮内，剌激体内致敏T细胞分化增殖，释放淋巴因子，引起局部皮肤的IV型超敏反应 淋巴细胞转化试验 T 细胞在体外培养时，受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)或特异性抗原刺激后，可出现代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增加、细胞体积增大并能进行分裂的淋巴母细胞，此称为淋巴细胞转化现象。 淋巴细胞转化率的高低，可以反映机体的细胞免疫水平，因此，可作为测定机体免疫功能的指标之一。正常值60－80％。 B细胞功能检测 抗体形成细胞的测定－