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生物安全实验室PCR实验室的建设要求
(一)主体结构
主体为彩钢板或铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50度内圆弧角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构要求牢固,线条简明,美观大方,密封性好。
(二)分区与气流组织
将PCR过程分成试剂准备、样本处理(核酸提取)、核酸扩增和产物分析四个独立的实验区,每个区域应严格分开、隔离。整个PCR实验区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区与走廊间应设置缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和实验环境的污染。
在缓冲区和PCR扩增区可安装排风扇往外排风,在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。要注意防止实验环境对核酸制备区的影响,防止造成污染。建议核酸提取工作在生物安全柜中进行,在样本处理区如涉及致病性病原微生物等感染性材料时,此区最好设计成负压,确保实验人员与环境安全。
(三)各区仪器设备的配置要求
工作区域仪器设备配置标准:
1.试剂储存和准备区
(1)2℃-8℃和-15℃冰箱;
(2)混匀器;
(3)微量加样器(覆盖1-1000ul);
(4)移动式紫外线灯(近工作台面);
(5)消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯);
(6)专用工作服和工作鞋;
(7)专用办公用品。
2.标本制备区
(1)2℃~8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱;
(2)高速台式冷冻离心机;
(3)混匀器;
(4)水浴箱或加热模块;
(5)微量加样器(覆盖1~1000ul);
(6)移动式紫外线灯(近工作台面);
(7)超净工作台;
(8)消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯);
(9)专用工作服和工作鞋;
(10)专用办公用品,如需处理大分子DNA,应具有超声波水浴仪。
3.扩增反应混合物配制和扩增区
(1)核酸扩增仪(PCR仪);
(2)微量加样器(覆盖1~1000ul);
(3)移动式紫外线灯(近工作台面);
(4)消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯);
(5)专用工作服和工作鞋;
(6)专用办公用品。
4.扩增产物分析区
视检验方法不同而定,基本仪器设备如下:
(1)凝胶成像仪或紫外检测仪;
(2)微量加样器(覆盖1~1000ul);
(3)移动式紫外线灯(近工作台面);
(4)消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头(带滤芯);
(5)专用工作服和工作鞋;
(6)专用办公用品。
应注意的事项是:
(1)各工作区域必须有明确的标记,避免不同工作区域内的设备、物品混用。
(2)进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
(3)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出实验室各区申用,应先消毒后再拿出实验区。
(4)其他事项可参照《临床检验扩增检验实验室管理暂行办法》。
(四)消毒要求
在四个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装紫外线灯,供消毒用。在试剂准备区和标本制备区还应设置移动式紫外线灯,对实验台面进行局部消毒,亦可配置移动式消毒设备。
(五)机械互锁不锈钢传递窗
试剂和标本通过机械互锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人、物分流)。
(六)地面
地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,其整体性好,便于清扫,材料要求耐腐蚀,防滑。没有条件的也可采用水磨石地面,或大块的地砖(至少800mm×800mm)。接缝需要小于2mm。有条件的可采用橡胶或塑胶地板。
(七)照明
要选用净化灯具,要具备便于清洗、不积尘的特点。
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