山豆根水提组分及醇提组分对小鼠急性肝毒性的量-时-毒关系研究.docxVIP

山豆根水提组分及醇提组分对小鼠急性肝毒性的量-时-毒关系研究 山豆根是越南的干燥根和根茎。它主要产于广西和贵州，也被称为光豆根、山豆根、苦豆根、柔枝槐、黄结等。 1 材料表面 1.1 川新荷中药饮片有限公司 山豆根 (Radix et Rhizome Sophorae Tonkinensise) , 购自四川新荷花中药饮片有限公司, 批号:0904280。 取山豆根药材150g两份, 置2 000mL圆底烧瓶中, 分别加10倍、8倍、8倍量水和10倍、8倍、8倍量90%乙醇回流提取3次, 1h/次, 滤过, 合并滤液, 分别浓缩制得生药量为2.99g·mL 1.2 动物 健康昆明种小鼠, SPF级, 体重 (20±2) g, 由山东大学实验动物中心提供, 合格证号:SCXK (鲁) 2 方法 2.1 山豆根醇提/全尾醇提 急性毒性实验结果 取小鼠210只, 雌雄各半, 按体重随机分成21组, 按处理时间点依次为0h (即正常组) , 山豆根水提组分1h, 2h, 4h, 6h, 8h, 12h, 24h, 48h, 72 h组;山豆根醇提组分1h, 2h, 4h, 6h, 8h, 12h, 24h, 48h, 72 h组。小鼠按25m L·kg 2.2 正常组和山豆根水提组、醇提组分的比较 取小鼠110只, 雌雄各半, 随机分为11组, 即正常组、山豆根水提组分和醇提组分各5个剂量组。山豆根水提组分5个剂量组剂量分别为3.494g·kg 3 结果 3.1 不同成分的山豆根小鼠胃的“时间-毒”关系研究 3.1.1 一般状况观察 3.1.2 小鼠灌胃山豆根水提液中alt和ast水平的比较 用南京建成公司提供的ALT、AST试剂盒分别测定小鼠给药后各时间点血清ALT、AST活性, 结果见表1和表2。 表1结果可见:小鼠灌胃山豆根水提组分后1h血清ALT、AST水平开始升高, 与0h组比较有极显著性差异;给药后6h血清ALT、AST水平达高峰, 毒性持续时间48h。 表2结果可见:小鼠灌胃山豆根醇提组分后1h血清ALT、AST水平开始升高, 与0h组比较有极显著性差异;给药后4h血清ALT、AST水平达到高峰, 毒性持续时间达24h。 3.1.3 对小鼠的影响 表3结果可见:给药6 h后即可出现肝脏明显肿大, 肝脏指数升高, 其中12 h肝脏指数升高最为明显;给药后小鼠脾指数、胸腺指数与给药前相比无明显差异。 表4结果可见:给药4 h后肝脏明显肿大, 肝脏指数升高, 其中12 h肝脏指数升高最为明显, 与0h组比较有非常显著性差异;给药后小鼠脾指数、胸腺指数与给药前相比无明显差异。 3.1.4 灌胃山豆根醇评分 光镜下观察, 0h组肝小叶结构清晰完好, 肝细胞未见明显变性、坏死, 肝窦未见明显淤血扩张。灌胃山豆根水提组分6h后, 肝小叶结构尚正常, 个别细胞变性坏死;12h后大部分细胞核固缩, 出现广泛的气球样变、玻璃样变、嗜酸性变性等, 有假小叶形成;72h后肝细胞形态基本恢复正常, 仍有个别细胞核固缩。灌胃山豆根醇组分6 h后, 肝小叶结构尚还正常, 部分肝细胞核固缩;12 h后, 大部分细胞核固缩, 间质细胞变性坏死;72h后部分肝细胞变性坏死。病理分级进行Radit分析、积分进行t检验, 结果见表5和表6。 表5结果可见:山豆根水提组分 (3.494g·kg 表6结果可见:山豆根醇提组分 (5.427 g·kg 3.2 不同成分的山豆根小鼠胃的“剂量-毒”关系研究 3.2.1 一般状况观察 3.2.2 对小鼠血清alt、ast活性的影响 用南京建成生物研究所提供的ALT、AST试剂盒分别测定小鼠灌胃不同剂量山豆根水提、醇提组分后6h/4h血清ALT、AST活性, 结果见表7和表8。 表7结果可见:小鼠灌胃不同剂量的山豆根水提组分后6h血清ALT、AST水平均有不同程度的升高, 且呈现一定的剂量相关性。 表8结果可见:小鼠灌胃不同剂量的山豆根醇提组分后4h血清ALT、AST水平均有不同程度的升高, 且呈现一定的剂量相关性。 3.2.3 山豆根醇提组分肝脏指数各成分配比 表9结果可见:山豆根水提组分各剂量组肝脏指数均有升高的趋势, 只有水提组分1组 (2.795g·kg 表10结果可见:山豆根醇提组分各剂量组肝脏指数均有升高的趋势, 只有醇提组分1组 (4.342g·kg 3.2.4 病理组织学检测 光镜下观察, 正常组肝小叶结构清晰完好, 肝细胞未见明显变性、坏死, 肝窦未见明显淤血扩张;山豆根水提组分、醇提组分5组与正常组基本相同;前四个剂量组肝小叶结构尚还正常, 肝细胞可见不同程度的细胞核固缩、细胞变性及坏死等。病理分级进行Radit分析、积分进行t检验, 结果见表11和表12。 表11可见:山豆根水提