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基于识别技术的质谱成像应用研究进展 在我们的日常生活中，摄影是记录生活的常用手段。我们的日常摄影设备也从旧的“黄瓜”相机转变为实用的轻量相机。相片所反映出来的是我们所生活的客观世界的一草一木、一人一景，我们可以看见轮廓和外在，却看不到内部的结构，为了更好地探索世界，也为了更好地了解生物体的奥秘，科学家在漫长的历史中发明出了很多种用于“窥探”这个世界内部结构的成像方法，比如有电子显微镜(Electron Microscope,EM)、光学显微镜(Optical Microscope,OM)、核磁共振(Magnetic ResonanceImaging,MRI)、计算机断层扫描(Computed Tomography,CT)等医学常用手段；还有荧光成像(Fluorescence Imaging)、原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)、扫描隧道显微镜(Scanning Tunnel Microscope,STM)成像等新方法。 这些技术虽然已经极大地促进了医学和科学的发展，但是在应用方面还有很多的不足，常用的医学成像手段分辨率较低，在医学检测的应用上有很大的限制；而分辨率较高的荧光成像技术需要使用荧光物质标记，从而会改变目标分析物所在的理化环境，在临床应用上有潜在的误差；发展迅速的原子力显微镜和扫描隧道显微镜虽然已经解决了分辨率低的问题，但是在应用上仍存在无法对被测物进行定性分析的弊端。 本文想给大家介绍的质谱成像(Mass Spectrometry Imaging,MSI)技术，不需要特异性标记，样品前处理步骤简单，空间分辨率高，同时还能发挥质谱的效能，在进行目标物成像的同时提供目标物的结构信息。得益于质谱技术的发展，质谱成像技术已经可以在较宽的质荷比范围内对小分子及大分子进行成像分析，并且受到了各领域科学家的广泛关注，也在近20年内取得了极大的发展。那么，究竟什么是质谱成像呢？ 当我们看到一张数码相片的时候，我们会知道这张相片是由红绿蓝三种颜色通道叠加而成的，色彩所拼接出的图像就是我们所生存的客观世界的二维表象。对于质谱成像而言，每一张照片是由成千上万个颜色通道叠加在一起的，每一种颜色通道所代表的是研究人员想要了解的一种目标分子，颜色的深浅代表着该物质的丰度，当这些通道互相覆盖叠加在一起，就会形成颜色各异、深浅不一的图像，进而反映出被研究分子的空间分布。 截止到目前为止研究人员为质谱成像设计了几十种方案，最常用、发展较好的有三种 这三种方法的原理虽各有不同，但都是在利用质谱进行质荷比(m/z)测定的基础上，结合特定的成像软件，对待测物不同部位的目标分子进行检测、鉴定、成像、叠加，进而得到反映待测物含量的空间分布情况的图像。 在质谱检测中，想要通过质量分析器得到样品中各类分子的m/z的信息，就要使被研究物质的表面解离和离子化。不同的质谱方法有着不同的手段，其中，SIMS-MSI主要利用初级离子束轰击待测品表面，再将从表面溅射出来的次级离子引入质量分析器进行质量分离和测定；而MALDI-MSI主要利用基质吸收激光能量，进而将能量传递给样品分子并使之电离；DESI-MSI则利用被雾化的带电液滴撞击样品表面，样品在被高速液滴撞击后发生溅射，进而进行质谱分析，得到质谱图。 软件对所得到的质谱峰进行识别，选定目标分子，根据该物质在样品不同位置处的相对出峰强度确定其含量分布，通过颜色深浅进行反映，便能得到该物质的成像图。对不同颜色图像进行叠加，便得到完整的成像图。 我们将在正文进一步对三种方法的发展及应用进行详细的介绍。 1 sims-ms法 次级离子质谱法(SIMS)成像是质谱成像方法中具有高分辨率的，应用最早的方法之一，它第一次跟世人见面是在20世纪80年代 为了适应越来越广泛的大分子检测需求，SIMS-MSI在近来年注重于软电离源的开发，通过选用新型的聚集离子束大大地减少了样品的表面损伤和碎片化 2005年，Winograd教授 近年来，利用串联质谱与SIMS-MSI结合，对检测到的分子进行了更加可靠的结构测定 SIMS相对于其他MSI技术的另一个关键优势是可以利用初级离子束逐渐去除材料表面，不断对新暴露的表面进行检测成像，通过不断循环该过程可以实现对于分析物的3D分析(即深度剖析)，其深度分辨率可以低至几纳米 截至目前，SIMS-IMS已经广泛应由于生命科学研究的各个领域，对于微生物生态学 2 基质辅助激光解析质谱成像技术 虽然SIMS-MSI已经得到了较快的发展，但是它对于生物大分子的检测效果仍不尽如人意。为了克服这一挑战，科学家研究并建立了MALDI-MSI。该方法在1994年第42届美国质谱学会(ASMS)会议期间被首次提出，后来在1997年被成功应用 1997年，Caprioli等 由于蛋白