表面改性az91d镁合金的点突变诱变性研究.docxVIP

表面改性az91d镁合金的点突变诱变性研究 目前，广泛应用于口腔的硬组织移植材料主要包括钛、钛合金、钴铬合金、不锈钢和聚乳液酸等。但是金属材料弹性模量远高于天然骨组织所致的应力遮挡效应及高分子材料较差的力学性能制约了其发展 AZ91D镁合金是应用广泛且机械性能较优良的一种镁合金材料。国外文献中已用于可降解材料的研究, 生物安全性好 1 材料和方法 1.1 微弧氧化ro 实验材料为AZ91D镁合金 (南京云海镁业有限公司) , 其化学成分质量分数为8.500%~9.500%铝, 0.170%~0.400%锰, 0.450%~0.900%锌, 0.050%硅 (max) , 0.1250%铜 (max) , 0.001%镍 (max) , 0.004%铁 (max) , 余量为镁。试样尺寸为25mm×25mm×2mm。实验前试样依次用酒精、丙酮、去离子水清洗并晾干。实验中所用微弧氧化试样均在中科院上海微系统所腐蚀中心进行SIMOXIDE微弧氧化处理。其电解液为含硅无机盐溶液。工艺流程为:表面精整、脱脂处理、中和、水洗、SIMOXIDE微弧氧化、水洗、干燥、封闭处理。工艺规范为: (1) 脱脂处理:RR-601高效清洁剂, 碱性, 超声波清洗, 25~40℃, 5~10min; (2) 中和处理:RR-602活化剂, 25~40℃, 1~3min; (3) SIMO-XIDE微弧氧化:10~20min, 电压为400~600V, 电源功率为65kW; (4) 水洗均在常温下进行。 1.2 大鼠伤寒的回归实验 1.2.1 菌株鉴定和对照 1, 制得的材料经超声波清洗30min, 高温、高压 (668kPa、121℃) 灭菌处理20min备用。 实验菌株:组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门菌 (S.Typhimurium) TA 97、TA 98、TA 100、TA 102, 由上海市疾病预防控制中心提供。试验前, 各菌株按照YY/T 0127.10-2001中方法进行如下鉴定: (1) 组氨酸需求 (his-) 试验; (2) 脂多糖屏障缺陷鉴定 (rfa突变) ; (3) 对紫外线敏感性鉴定 (uvrB修复缺陷型的鉴定) ; (4) 抗氨苄青霉素 (PKM 101) 试验 (菌株R因子丢失鉴定) ; (5) 四环素 (PAQI) 抗性的鉴定; (6) 自发回变数 (his+) 的测定; (7) 对阳性突变剂的敏感性鉴定。菌株鉴定符合要求, 菌株贮存在加有二甲基亚砜 (光谱纯) 的新鲜细菌培养液中, 其体积比为0.09∶1, 混合后分装于小试管内, 液氮 (-196℃) 速冻, 在-196℃液氮中长期贮存。 增菌方法:置于37℃恒温摇床 (100次/min) 培养6h备用。 大鼠肝微粒体酶 (S-9) 由复旦大学公共卫生学院提供。储存于-196℃液氮内。 对照物:阴性对照:蒸馏水 (自发回变) 。溶剂对照:人工唾液。阳性对照:敌克松[对二甲基氨基苯重氮磺酸钠, 50μg/ (0.1ml·皿) ], 2-氨基芴[10μg/ (0.1ml·皿) ], 叠氮钠[1.5μg/ (0.1ml·皿) ], 1, 8-二羟基蒽醌[50μg/ (0.1ml·皿) ]。 1.2.2 实验方法材料浸提液制备 参照中华人民共和国国家标准YY/T 0127.2-93《口腔材料生物学评价》所规定的浸提液制备方法 实验参照中华人民共和国国家标准YY/T 0127.10-2001《口腔材料生物学评价》第2单元:口腔材料生物试验方法鼠伤寒沙门杆菌回复突变试验中所规定的方法 2 结果 2 回复突变试验 由表1、2可见, 无论在-S-9和+S-9的情况下, 微弧氧化AZ91D镁合金各剂量组均未引起测试菌株回变菌落数的明显增加, 而阳性对照组引起测试菌株的回变菌落数明显增加, 并超过自发回变和溶剂对照的2倍以上。显示微弧氧化AZ91D镁合金回复突变实验结果为阴性。 3 镁的潜力作用及微弧氧化的必要性 镁合金作为硬组织植入材料, 与现已投入临床使用的各种金属植入材料相比, 具有以下突出的优点: (1) 镁及镁合金的机械性能比其他常用金属材料更接近天然骨, 其适中的弹性模量能够有效缓解应力遮挡效应, 对骨折愈合、种植体的稳定具有重要作用。 (2) 镁是人体必需的元素, 也是组成骨的主要成分, 能促进骨、牙齿及细胞形成并在骨的矿物质代谢中起重要的调节作用。用镁作为硬组织植入材料, 不但不用考虑微量金属离子对细胞的毒性, 而且植入材料中的镁离子对人体的微量释放还是有益的。 (3) 镁的资源丰富, 价格低廉 微弧氧化是在有色金属表面原位生长陶瓷层的新技术, 又称微等离子体氧化或阳极火花沉积。微弧氧化可显著提高材料的耐蚀性、耐磨性和硬度而广泛应用于航空、航天、机械、电子、纺织、装饰等领域。本课