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医用可吸收合成缝合线细菌回复突变试验 随着医用可生物降解聚合物材料的开发，肥胖醇酸聚合物的独特异质分解、生物相容性和生物可吸收性在医疗生物降解材料中得到了广泛应用。其优异的生物降解性来源于聚合物分子链中的酯键, 在自然环境和生物体内均易受到进攻而发生断链, 进而降解。目前, 在此领域研究的最多, 应用最广泛的是聚左旋乳酸 (PLA) 、聚乙交酯 (PGA) 、聚己内酯 (PCL) 等。同样为脂肪族聚酯的聚对二氧环己酮 (poly (p-dioxanone) , PPDO) 也具有非常优异的生物相容性、生物可吸收性和生物降解性;此外, 由于其分子链中具有独特的醚键, 所以具有良好的柔韧性, 是理想的手术缝合材料, 同时还可以用于制造骨板和组织修复材料, 具有广泛的应用前景 1. 数据和方法 1.1 试剂及仪器 仪器:多用生化培养箱 (沈阳市伟明医疗设备厂) ;立式灭菌器 (山东新华医疗器械股份有限公司) ;电子天平 (梅特勒-托利多仪器有限公司) ;双功能水浴恒温振荡器 (江苏金坛亿通电子有限公司) 。 试验材料:营养肉汤培养基、琼脂粉 (北京索莱宝生物科技有限公司) ;碳酸氢钠铵、柠檬酸、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠 (国药集团化学试剂有限公司) ;磷酸氢二钾、葡萄糖、氯化钾、氯化镁 (天津大茂化学试剂厂) ;硫酸镁 (天津博迪化工股份有限公司) ;萄糖-6-磷酸钠盐、辅酶-Ⅱ (氧化型) (SIGMA-ALDRICH公司) ;2-氨基芴 (2-AF, Dr.Mao公司) ;甲基磺酸甲酯 (MMS, Dr.Ehrenstorfer Gmb H公司) 、敌克松 (Dr.Ehrenstorfer Gmb H公司) ;医用可吸收合成缝合线 (材质:聚对二氧环己酮) 由企业提供。 试验菌株:TA97, TA98, TA100, TA102 (美国Moltox公司) 来源于上海宝录生物科技有限公司。 1.2 方法 1.2.1 接种ta97、84、100、126 取营养肉汤培养基5m L, 加入无菌试管中, 接种TA97、98、100、102, 在 (37±2) ?C、 (115~125r/min) 振荡培养18h至对数生长期, 活菌数不少于1×10 1.2.2 试验溶液的制备 取可吸收合成缝合线按6cm 1.2.3 培养基浸提液制备 (1) 融化顶层培养基分装于无菌小试管, 每管2m L, 在45?C水浴中保温。 (2) 在保温的顶层培养基中依次加入每种试验菌株新鲜菌液0.1m L, 混匀;试验样品组分别加0.1m L试验材料浸提液, 活化组再加10%S9混合液0.5m L, 无活化组加0.2mol/L磷酸盐缓冲液0.5m L, 每组3管, 再混匀, 迅速将每管溶液分别倾入底层培养基上, 转动平皿使顶层培养基均匀分布在底层上, 平放固化。 (3) 阴性对照组分别加入0.1m L浸提介质, 活化组再加10%S9混合液0.5m L, 无活化组加入0.2mol/L的磷酸盐缓冲液0.5m L。阳性对照组分别加阳性诱变剂0.1m L, 活化组再加10%S9混合液0.5m L, 无活化组加0.2mol/L磷酸盐缓冲液0.5m L, 其他步骤同“ (2) ”。 (4) 全部平皿倒置于37?C培养箱中培养48~72h, 观察结果。重复试验1次。 2. 结果 表1、表2结果显示, 在+S 3. 浸提液的制备 在试验中, 医用可吸收合成缝合线浸提液制作的方法上参考了GB/T 16886.12-2005所规定的浸提液制备方法, 采用了Ames试验方法中的平板掺入法, 试验结果为阴性, 说明材料无明显的致突变性。但由于存在菌株变异等原因, 尚需进行染色体畸变试验、DNA损伤试验等相关的试验, 才能对其致突变性作出较全面的预测。