SN_T 1474-2014传染性造血器官坏死病检疫技术规范.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1474—2014代替SN/T1474—2004传染性造血器官坏死病检疫技术规范Quarantine protocol for infectious haematopoietic necrosis2014-11-19 发布2015-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局R线：408150m、刮涂层查真伪 SN/T1474—2014前 創言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1474一2004《传染性造血器官坏死病毒逆转录聚合酶链式反应操作规程》。本标准与SN/T1474--2004相比，除编缉性修改外，主要技术变化如下：一修改了标准的名称；一增加了临床症状、病毒分离、中和试验、间接免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验；一删除了原标准的套式逆转录聚合酶链式反应方法，替换为逆转录聚合酶链式反应方法。本标准修改采用了世界动物卫生组织（OIE）《水生动物疾病诊断手册》（2012年版）第2.3.4章，主要修改如下：一原文中“Diseaseinformation”内容经修改简缩后作为本标准附录A；删除了原文第5节中检测方法的选择依据和第6节传染性造血器官坏死病无疫区的相关内容。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、河南省水产技术推广站。本标准主要起草人：贾鹏、何俊强、杨俊兴、杨雪冰、郑晓聪、于力、王津津、刘、花群义、史秀杰、兰文升、陈兵、王红英。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1474—2004。1 SN/T 1474—2014传染性造血器官坏死病检疫技术规范1范围本标准规定了传染性造血器官坏死病临床症状、病毒分离、逆转录聚合酶链式反应、酶联免疫吸附试验、中和试验、间接免疫荧光试验的检测方法本标准适用于传染性造血器官坏死病的诊断、监测和检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB/T18088出人境动物检疫采样GB19489实验室生物安全通用要求3概述传染性造血器官坏死病（Infectioushaematopoieticnecrosis，IHN）是由传染性造血器官坏死病病毒（Infectioushaematopoieticnecrosisvirus，IHNV）感染鲑、鱼类后引起死亡的一种病毒性传染病，被世界动物卫生组织（OIE)列人水生动物疫病名录，我国将其列为二类动物疫病（参见附录A）。4缩略语下列缩略语适用于本文件，CPE：细胞病变效应（cytopathiceffect）dNTPs：脱氧核糖核苷酸（deoxynucleotidetriphosphates）DEPC：焦碳酸二乙酯（diethypyrocarbonate);3EPC:鲤鱼上皮瘤细胞系（epithelioma papulosum cyprini)EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid)ELISA：酶联免疫吸附实验（enzyme-linkedimmunosorbentassay）FHM：肥头鲤细胞系（fatheadminnow）FBS：胎牛血清(fetalbovine serum)FITC：异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate）HEPES:4-羟乙基哌嗪乙磺酸[4-（2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acidHRP：辣根过氧化物酶（horseradishperoxidase）IHN：传染性造血器宫坏死病（infectioushaematopoieticnecrosis）IHNV：传染性造血器官坏死病毒（infectioushaematopoieticnecrosisvirus）IPNV：传染性胰脏坏死病毒（infectiouspancreasnecrosisvirus)1 SN/T 1474-2014RNA：核糖核酸(ribonucleicacid)RT-PCR：逆转录聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction)5仪器和设备5.1组织研磨器或无菌研钵。5.22恒温培养箱。5.3倒置荧光显微镜。5.4PCR扩增仪。5.55水平电泳仪。5.65凝胶成像仪。5.7酶标仪。5.83普通冰箱和一80℃超低温冰箱。5.9降温离心机。5.10微量移液器。5.11二级生物安全柜。5.12剪刀、镊子、离心管、PCR管和细胞培养器皿等耗材