NY_T 2639-2014稻米直链淀粉的测定 分光光度法.pdf

ICS 67.060B 22NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2639—2014稻米直链淀粉的测定分光光度法Determination of amylose content in rice-Spectrophotometry method2015-01-01实施2014-10-17发布中华人民共和国农业部发布 NY/T2639—2014前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心-本标准主要起草人：段彬伍、孙成效、朱智伟、陈能、方长云、何小嫣、于永红、卢林I NY/T 2639—2014稻米直链淀粉的测定分光光度法1范围本标准规定了稻米直链淀粉的分光光度测定方法本标准适用于稻米直链淀粉的测定.不适用于熟化稻米直链淀粉的测定。2规范性引用文件下列文件对本义件的引用是必不可少的。凡是注日期的引用义件.仅注日期的版本适用于本义件。凡是不注日期的引用义件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本义件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T15683大米直链淀粉含量的测定3原理稻米淀粉与碘形成显色复合物.在波长620nm处测定显色复合物的吸光度值.其吸光度值与直链淀粉含量成正比。4试剂除非另有规定.仅使用分析纯试剂.水为GB/T6682中规定的三级水。4.1试剂4.1.1 乙醇(CH,CH.()H):95%。4.1.2 冰乙酸(CH:COOH)4.1.3柠檬酸(CH()·2H))。4.1.4氢氧化钠(Na()H)。4.1.5 碘(1.)。4.1.6碘化钾(KI)。4.1.7氢氧化钠溶液[c(Na()H)=1mol/I.]：称取40.0g氢氧化钠(Na)H)溶于1000ml.水中，混勺4.1.8氢氧化钠工作液[c(Na()H)=0.005mol/1.]：吸取5.0ml.氢氧化钠溶液（4.1.7）.定容至1000ml.临用前配制。4.1.9乙酸溶液c(CHC(0)H)=1mol/II：量取57.8mL冰乙酸（CH.C0)H）.定容至1000ml4.1.10碘液：称取2.000±0.005g碘（1.）和20.000±0.001g碘化钾（K1)用少量水溶解，定容至1000mL.避光保存。4.1.11碘工作液：吸取12.5ml碘液（4.1.10）于250ml.容量瓶中，加人5.0ml乙酸溶液（4.1.9)，定容。临用前配制。4.1.12柠檬酸溶液：称取5.6g柠檬酸（C,H.（)，·2H.()）.用水溶解.加人5.0ml.冰乙酸(CH,C0H).定容至1000ml.。4.2直链淀粉参比样：糯米及具高、中、低直链淀粉含量的大米参比样品各一个（其直链淀粉含量预先经GB/T15683中的方法准确测定）。1 NY/T2639—20145仪器5.1分光光度计或流动注射仪。5.2分析天平，感量士0.0001g5.3实验室用粉碎机，可将大米粉碎，并过0.25mm筛。5.4水浴锅。5.550ml容量瓶。6分析步骤6.1试样制备稻谷试样需先行脱壳并踞磨成精米。将精米试样混匀，分取约10g试样，粉碎并过0.25mm筛，装入纸袋。将其与直链淀粉参比样（4.2)在相同的条件下放置2d.以平衡水分。6.2试液制备称取试样和参比样各（50士0.2）mg，分别置于50ml.容量瓶中，加人0.5mL95%乙醇.使样品湿润分散，再沿颈壁加人4.5ml.氢氧化钠溶液（4.1.7），轻轻摇匀，随后将其置于沸水浴中煮沸10min，取出，冷却至室温，以水定容。作为直链淀粉参比样溶液及试料待测液，备用，6.3空白溶液制备吸取4.5mL氢氧化钠溶液（4.1.7）于50mL容量瓶中，以水定容。6.4测定6.4.1分光光度计测定标准曲线的制作：分别吸取糯米，具低、中、高直链淀粉含量的参比样溶液和空白溶液（6.3）2.50ml于50ml容量瓶中，加水约25mL，再加人0.5ml乙酸溶液（4.1.9）和1.0mL碘液（4.1.10）。以水定容，静置10min.待测。分光光度计以空白溶液调零，在波长620nm处测定参比标准溶液的吸光度值。以吸光度值为纵坐标，直链淀粉含量为横坐标，绘制标准曲线。直链淀粉含量以精米干基质量分数表示。试液测定：吸取待测液2.50mL于50ml.容量瓶中，加水约25ml，再加人0.5ml.乙酸溶液（4.1.9）和1.0ml.碘液（4.1.10），以水定容，静置10min后，在波长620nm处测定溶液的吸光度值。6.4.2流动注射分析仪测定打开流动注射分析仪，预热稳定。按照说明书调整仪器至正常工作状态，测定波长设为620nm。按仪器规定调整泵速，清洗管路10min～20min。按标识将管线分别接人氢氧化钠工作液（4.1.8）、碘工作液（4.1.1