气相色谱-质谱法同时测定不同产地的不同多氯联苯.docxVIP

气相色谱-质谱法同时测定不同产地的不同多氯联苯 1 在其他工业产品生产中的使用 多氯联苯（nbs）是联苯环上的氢氯仿替代产品。由于其稳定的化学性质，它被用作各种工业产品的原料。但同时由于其性质稳定,在自然环境中极难分解,因此能长期稳定存在,造成环境污染 目前,我国和一些发达国家都对水产品中的PCBs含量作了规定,例如,美国对进口水产品中PCBs含量的规定为不高于2.0 mg/kg,欧盟规定不得检出,日本规定近海水产品中PCBs的含量应不高于3.0 mg/kg,而我国则规定水产品中最为常见的PCBs(PCB28、PCB52、PCB101、PCB138和PCB153)的限量为2.0 mg/kg 2 材料和方法 2.1 高效液相色谱法 三文鱼500 g (广州市售);无水硫酸钠、石油醚、硫酸、丙酮、弗罗里硅土和硅胶(分析纯,广州试剂厂);正己烷(色谱纯,美国Fisher公司);层析柱(20 cm×2 cm);PCBs(PCB18、PCB33、PCB44、PCB70、PCB105、PCB128、PCB170、PCB187、PCB194、PCB195、PCB199和PCB206)标准品(纯度大于99%,上海甄准生物科技有限公司)。 6890N/59731气相色谱-质谱联用仪(美国Agilent公司);MS3 basic漩涡混合器(德国IKA公司);D3024R冷冻高速台式离心机(美国Scilogex公司)。 2.2 实验方法 2.2.1 标准溶液的配制 PCBs标准贮备液的配制:准确称取各PCBs标准品,用正己烷溶解并定容,配制成浓度均为1000μg/L的标准贮备液。 PCBs混合标准工作液的配制:将上述12种PCBs的标准贮备液用正己烷稀释,配制成各PCBs浓度均为0、10.0、20.0、100、200和1000μg/L的混合标准工作液。 2.2.2 样品的提取制备 制样:取100 g三文鱼样品的可食部分绞碎,存放于-18℃冰箱中。 提取:准确称取5 g绞碎的三文鱼样品于50 mL离心管中,加入10 g无水硫酸钠,20 mL石油醚,涡旋混匀,超声提取20 min,离心,取上清液。样品按照上述步骤重复提取1次,将2次的提取液合并。于提取液中加入4 mL浓硫酸(提取液和浓硫酸的体积比为10:1),轻轻振摇30 s后,静置分层,弃去酸层,再按上述操作重复净化1～2次,至酸液呈无色或淡黄色。将得到的提取液氮吹浓缩至2 mL左右。 净化:装柱(层析柱20 cm×2 cm),从下往上分别是1cm无水硫酸钠,5 cm弗罗里硅土,5 cm硅胶和1 cm无水硫酸钠。用10 mL丙酮活化后上样,用正己烷洗脱2次,每次10 mL,洗脱液用氮气浓缩至1 mL,供GC-MS分析。 2.2.3 仪器和质谱条件 气相色谱条件:DB-5MS色谱柱(30 m×250μm,0.25μm);色谱柱升温程序:60℃(0 min),以10℃/min的速率升至220℃(保持4 min),再以15℃/min升至285℃(保持5 min);进样口温度:270℃;载气为氦气,流速为1.5mL/min;接口温度:270℃。 质谱条件:离子源温度为230℃;传输线温度为280℃;电子轰击电离源(70 eV);溶剂延迟10 min。通过全扫描获得12种PCBs的总离子流图。 3 结果与分析 3.11 种pcbs的定性和定量离子 选择丰度高的特征离子作为定量离子,2个以上丰度相对较高的特征离子作为定性离子,得到12种PCBs的定性和定量特征离子见表1。12种PCBs的总离子流色谱图见图1。 3.2 样品前处理条件的优化 3.2.1 超声时间的确定 由于三文鱼中含有一定量的脂肪,因此超声可提高石油醚对样品中PCBs的提取率,但长时间的超声会使石油醚挥发,导致提取出过多的油溶性杂质,从而影响净化效果,因此超声时间不宜过长。本研究探究了超声时间对PCBs回收率的影响,每个样品平行测定6次(n=6),结果如图2所示。从图中可以看出,PCBs的回收率随超声时间的延长而提高,当超声时间超过20 min时,12种PCBs的平均回收率变化不明显,但考虑到节省时间,因此选择20min为超声提取时间。 3.2.2 浓硫酸加入量对pcbs回收率的影响 由于石油醚对油溶性物质具有较强的提取效果,而PCBs具有高度耐酸碱的能力,因此使用浓硫酸能有效除去PCBs以外的杂质。但由于浓硫酸具有强氧化性,若浓硫酸一次性加入量过大,会使PCBs发生氧化反应,从而降低PCBs的回收率。本研究对比了不同浓硫酸加入量对PCBs回收率的影响,结果如图3所示。从图中可以看出,当浓硫酸的加入比例(浓硫酸:提取液,V:V)小于10:1时对PCBs的回收率影响较小,表明加入比例为10:1时的净化效果较好;随着浓硫酸比例的增加,12种PCBs