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茶叶中蔗糖的检测方法
1 范围
本文件规定了使用高效液相色谱仪测定茶叶中蔗糖的方法。
本文件适用于茶叶中蔗糖含量的测定。第一法适用于蔗糖含量大于等于0.075g/100g的试样,第二
法适用于蔗糖含量大于等于1.5g/100g的试样。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本 (包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 8302 茶 取样
GB/T 8303 茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定
第一法 蒸发光散射检测器法
3 原理
试样用乙酸乙酯提取,去除蜡质、色素等干扰成分后,再用水提取蔗糖。提取液经固相萃取柱净化,
去除茶多酚、色素等干扰成分后,用高效液相色谱仪分离,蒸发光检测器检测,外标法定量。
4 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用的试剂均为分析纯,水为GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 乙腈 (CH CN,CAS号:75-05-8):色谱纯。
3
4.1.2 乙酸乙酯 (C H O ,CAS号:14-78-6)。
4 8 2
4.2 材料
4.2.1 微孔滤膜:0.45µm,水相。
4.2.2 茶叶专用净化小柱:NPP,200mg/2.5mL。
注:NPP净化小柱是北京科德诺思技术有限公司的商品型号,给出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不是表
示对该产品的认可。可使用其它等效的产品。
4.3 标准品
蔗糖 (C H O ,CAS 号:57-50-1):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
12 22 11
4.4 标准溶液配制
4.4.1 标准储备液 (20.0mg/mL):称取经过96℃±2℃干燥至恒重的蔗糖 1g (精确到0.0001g),用
水定容至50mL,密封置于4℃下可贮藏 1个月。
4.4.2标准中间液 (1.00mg/mL):准确吸取储备液0.500mL 于 10mL 容量瓶中,用水定容。 (临用
时现配)
4.4.3标准使用液A:分别准确吸取蔗糖标准储备液 (4.4.1)0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL 于
2
10mL 容量瓶中,用水定容。该系列标准使用液的浓度分别为:1.00mg/mL、2.00mg/mL、5.00mg/mL、
10.0mg/mL。 (临用时现配)
4.4.4标准使用液B:分别准确吸取标准中间液 (4.4.2)0.50mL、2.00mL、5.00mL 于 10mL 容量瓶
中,用水定容。该系列标准使用液的浓度分别为:0.0500mg/mL、0.200mg/mL、0.500mg/mL。 (临用
时现配)
5 仪器和设备
5.1 分析天平:感量为0.001g 和0.0001g。
5.2 超声波振荡器。
5.3 离心机:转速≥4000r/min。
5.4 液相色谱仪:配备蒸发光散射检测器。
5.5 粉碎机:粉碎细度40 目~200 目。
6 试样制备和保存
6.1 取样
按照GB/T 8302 的规定执行。
6.2 试样制备和保存
6.2.1紧压茶以外的各类茶:试样用粉碎机粉碎,过300 µm的标准网筛,筛上少量茶梗,弃去。筛下试
样常温密闭避光保存。
6.2.2紧压茶:用锤子和凿子将紧压茶分成4份~8份,在每份不同处取样。或用电钻在紧压茶上均匀钻
孔9个~12个,将所有取下来的试样混合后粉碎。余下步骤同6.2.1。
7 分析步骤
7.1 干物质含量测定
按GB/T 8303的规定执行。
7.2 样品处理
7.2.1样品提取
称取混匀试样约2 g (精确到0.001g)于50mL 离心管中,加入 10mL 乙酸乙酯,摇匀,于超声波
振荡器上超声提取5min,于4000r/min 下离心5min。用吸管吸取上清液,弃去。余下茶渣用适量水转
入50mL 容量瓶,超声提取5min,冷却至室温用水定容至刻线。摇匀后静置,上清液备用。
7.2.2净化
将茶叶专用净化小柱 (4.2.2
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