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《茶叶中蔗糖的检测方法》征求意见稿
编 制 说 明
概要
任务来源、起草单位
依据中华全国供销合作总社归口行业标准体系与行业品牌建设业计划项目(第一批)制定本标准。项目计划编号:2021GH-ZD-07。
本标准的起草单位有:国家茶叶产品质量监督检验中心(四川)、北京市茶叶质量监督检验站、中国茶叶流通协会、四川省轻工业研究设计院有限公司(国家轻工业食品质量监督检测成都站)、北京食品科学研究院、雅茶集团茶业有限公司。
主要起草过程
本标准的起草分为方法的摸索,方法的优化、方法验证三个阶段。
1.蔗糖的定性和定量不是本方法的难点,难点是如何从茶叶复杂基质中分离出蔗糖,便于液相色谱仪检测。过程中比较了多种蜡质去除试剂,比如二氯甲烷就比现在标准中使用的乙酸乙酯的效果好,但是二氯甲烷是有毒有害物质,被列入我国大气和水污染名录,基于对环境保护的考虑,基于对工作人员健康影响的考虑,权衡利弊关系。我们选择了乙酸乙酯。另外,茶叶基质和普通食品有较大差异,普通食品主要的组分是蛋白、脂肪和碳水化合物,而茶叶中占到茶叶干重的20%以上的物质是茶多酚。这就决定了茶叶试样的前处理和普通食品不应相同,这也是GB 5009.8《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》不适宜茶叶中蔗糖测定的主要原因。
2.在方法优化阶段遇到两个比较大的问题,一个是,方法的精确性和操作的高效和便捷性之间的矛盾,比如,在标准中试样用乙酸乙酯提取后的下一步骤是采用过滤后再定容,还是直接吸去乙酸乙酯层。前者更精确,后者更便捷高效。在比较了两种方案的结果差异后,在权衡经济效益和精确度要求之后,我们选择了快捷高效的方案。另一个问题是,在做样品均匀性试验的过程中我们发现,样品的颗粒度和分析结果的重复性和再现性关系非常大,在做了上百组分析测试后,为了将方法的重复性和再现性锁定在合理的区间,我们最终确定样品过60目筛,即试样颗粒直径控制在0.3mm以下。
3.本标准草案的方法验证按GB 6379.2的规则执行,邀请了8家实验室参与方法验证,验证的方法性能参数有:检测限、定量限、回收率、线性范围、重复性、再现性。(详见附录1协同实验分析报告)
4.茶叶中蔗糖含量较低,长期以来不被关注。为验证本方法对六大茶类及茉莉花茶的适用性,制标小组检测了各类茶中蔗糖的含量水平。(详见附录2茶叶中蔗糖含量普查数据及分析)同时,希望这些数据能给行业提供参考。
在广泛吸纳意见的基础上,咨询行业内专家,于2023年5月形成了征求意见稿。
标准制定的必要性、目的和意义
我国规定茶叶中不能添加任何非茶类物质,近年来我们发现有部分茶叶的水浸出物异常偏高,经确认其中含有蔗糖。为进一步确认其中的蔗糖含量水平时遇到困难,因为现有标准体系中缺失检测茶叶中蔗糖的方法。此外,我国有部分出口茶叶是添加了蔗糖的,这些企业希望能够控制其中的添加量,有检测其中蔗糖含量的需求。所以有必要制定茶叶中蔗糖的检测方法标准,一方面监控行业内往茶叶中添加蔗糖的行为,另一方面为出口茶中蔗糖的检测提供技术支撑。
标准主要技术内容
标准的结构及描述规则
按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准的结构和编写规则》的要求制定本标准。
范围
文件规定了使用高效液相色谱仪测定茶叶中蔗糖的方法。
3. 规范性引用文件
给出了引用后成为本文件必不可少的条款的几个标准,如:GB 6379.2和GB/T 8302等。
第一法 蒸发光散射检测器法
原理
试样用乙酸乙酯提取,去除蜡质、色素等干扰成分后,再用水提取蔗糖。提取液经固相萃取柱净化,去除茶多酚、色素等干扰成分后,用高效液相色谱仪分离,蒸发光检测器检测,外标法定量。
试剂或材料
包括试剂、材料清单以及标准品的配制。
仪器设备
包括方法中使用到的主要设备和辅助设备。
试样制备和保存
详述了试样的制备和保存方法。
分析步骤
包括样品前处理、使用液相色谱仪时的参考条件、标准曲线的制作、样品测定和空白试验。
分析结果的表述
给出了蔗糖含量的计算式和结果的保留位数。
重复性和再现性
依据GB 6379.2《测量方法与结果的准确度 第二部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法》的规则,邀请8家实验室协同实验,邀请统计专家对数据进行处理,确定了方法的性能参数:重复性和再现性。(详见附件1协同实验报告)
检测限和定量限
称取不含蔗糖的黑茶试样2g,添加蔗糖0.5mg,按本方法处理试样并测定,达到仪器的可辨别信噪比,确定方法的检测限为0.025g/100g,3倍检测限定为方法的定量限,为0.075g/100g。协同实验的8家实验室的结果如下:
第二法 示差折光检测器法
原理
试样用乙酸乙酯提取,去除蜡质、色素等干扰成分后,再用水提取蔗糖。提取液经固相萃取柱净化,去除茶多酚、色素等干扰成分后,用高
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