生命科学导论课件.ppt

第十二章;12.1 生物技术定义、主要内容和发展概况 12.2 基因工程 12.3 蛋白质工程、发酵工程和细胞工程简介 12.4 分子诊断和基因治疗 12.5 克隆技术 12.6 生物芯片技术 12.7 生物技术的安全性和社会伦理问题;生命科学成为当今世界自然科学的热点和重点，主要由于两方面的原因： ;生物技术的显著特点高技术（精细和密集的复杂技术）高投入（尤其是前期科研投入高）高利润;1982年，国际合作与发展组织的定义为：生物技术是应用自然科学及工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品为社会服务的技术。 美国政府技术顾问委员会(OAT) 的定义是：应用生物或来自生物体的物质制造或改进一种商品的技术，其还包括改良有重要经济价值的植物与动物和利用微生物改良环境的技术。 该定义强调了生物技术的商品属性。;基因工程、细胞工程、发酵工程、蛋白质（酶）工程此外还有基因诊断与基因治疗技术、克隆动物技术、生物芯片技术、生物材料技术、生物能源技术、利用生物降解环境中有毒有害化合物的技术 直接相关联的学科：分子生物学、微生物学、生物化学、遗传学、细胞生物学、化学工程学、医药学等。 对人类和社会生活各方面影响最大的生物技术领域：农业生物技术、医药生物技术、环境生物技术、海洋生物技术;基因工程是指在微观领域（分子水平）中，根据分子生物学和遗传学原理，设计并实施一项把一个生物体中有用的目的DNA(遗传信息)转入另一个生物体中，使后者获得新的需要的遗传性状或表达所需要的产物，最终实现该技术的商业价值。;重组DNA技术的重大突破带动了现代生物技术的兴起，并很快产生了许多生命科学的高技术产业。 重组DNA技术，又称为基因或分子克隆技术，是基因工程的核心技术。该技术包括了一系列的分子生物学操作步骤。 ;重组DNA操作一般步骤：;获得需要的目的基因（外源基因）; 细胞内总DNA的提取分离与基因文库的构建; 紫外分光光度计测定DNA溶液的纯度和浓度。; 基因文库的构建 将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，便构成了??生物的基因文库。; 反转录人工合成互补DNA; 聚合酶链式反应（PCR）;变性、退火、延伸三步曲。;每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍。; PCR技术的发明;构建重组质粒和基因克隆;已经发现和鉴定了200多种; 载体;1．该质粒比较小，可以插入一段较长的DNA片段。 2．进入宿主细菌细胞后，pUC18在每个细胞中可复制形成大约500个拷贝。 3．在pUC18中有一小段人为设计和插入的具有多种限制性酶切位点的序列，即多克隆位点; pUC118质粒的多克隆位点整合在lacZ基因中，该位点如果没有插入外源目的基因，lacZ基因便可表达出?半乳糖苷酶，如果平板培养基中含有IPTG和X-gal，X-gal便会被?半乳糖苷酶水解成兰色，大肠杆菌形成蓝色克隆。 在多克隆位点插入外源目的基因，破坏了lacZ基因的结构，大肠杆菌形成白色的克隆; 以大肠杆菌为宿主菌进行基因的克隆; 一般克隆基因的检查和鉴定方法;32P标记的DNA分子探针 杂交 放射自显影法;转化受体细胞和转化子的筛选;构建缺失chlL基因的蓝细菌突变株;遗传转化常用的方法;转化子的分析—Southern杂交;Southern杂交分析示例; 稀少珍贵的蛋白质药物; 畜牧业中的应用; 种植业中的应用; 种植业中的应用;“后基因组时代”将是“蛋白质组学时代”，即从对基因信息的研究转向对蛋白质信息的研究，包括研究蛋白质结构、功能与应用及蛋白质相互关系和作用。 蛋白质工程就是在对蛋白质的化学、晶体学、动力学等结构与功能认识的基础上，对蛋白质人工改造与合成，最终获得商业化的产品。;蛋白质工程的主要步骤通常包括： （1）从生物体中分离纯化目的蛋白； （2）测定其氨基酸序列； （3）借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段，尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;;现代发酵工程主要指利用微生物、包括利用DNA重组技术改造的微生物在全自动发酵罐或生物反应器中生产某种商品的技术。 现代发酵工程是生物代谢、微生物生长动力学、大型发酵罐或生物反应器研制、化工原理等密切结合和应用的结果。;细胞工程是指通过细胞水平上的筛选或改造，获得有商业价值的细胞株或细胞系，再通过规模培养，获得特殊商品的技术与过程。 细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程，它们分别以动物细胞和植物细胞为主要生产对象，以细胞培养为主要过程和内容。;动物细胞培养;单细胞藻类培养;高等植物细胞培养;细胞融合、细胞重组、杂交瘤技术;12.4 分子诊断和基因治疗; 分子诊断; 分子诊断;例：特异性互补寡核苷