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box-behnken设计-效应面法优化槲皮素纳米混悬剂工艺及体外累积释放度评价 黄酮类化合物（quercetin，q）具有抗癌、抗癌、高血压、抗抑郁、镇静催眠等作用。但由于槲皮素亲水性差、吸收差、口服生物利用度低, 限制了其临床应用 纳米混悬剂 (nanosuspension, NS) 是采用少量表面活性剂作为稳定剂的“纯药物”粒子所构成的一种亚微米胶体分散体系 本研究参考文献方法 1 仪器、试剂与药品 集热式恒温加热磁力搅拌器 (DF101S, 北京恒丰长伟科技有限公司) ;粒度/Zeta电位测定仪 (Zetasizer Nano ZS, 英国马尔文仪器有限公司) ;智能溶出试验仪 (ZRS-8G, 天津市天大天发科技有限公司) ;紫外分光光度计 (UV-2401PC, 日本岛津公司) 。 槲皮素原料药 (批号CY160517, 陕西慈缘生物技术有限公司) ;槲皮素对照品 (批号100081-201610, 中国食品药品检定研究院) ;泊洛沙姆188 (P188, 批号WPCH530B, 北京风礼精求商贸有限责任公司) ;无水乙醇 (批 北京化工厂) 。 2 方法和结果 2.1 磁力搅拌法 采用微型化介质研磨法制备QT-NS, 称取8.0mg P188于10 m L的西林瓶中, 加入4.0 m L蒸馏水和磁力搅拌子, 适当搅拌, 混匀, 加入QT 40.0 mg和粒径为0.4~0.6 mm氧化锆珠子 (3.5, 4.0, 4.5m L) , 通过调节磁力搅拌的转速 (500, 700, 900 r·min 2.2 粒径和多分散度指数 取适量QT-NS, 加蒸馏水稀释, 采用粒度/Zeta电位测定仪测定QT-NS的粒径 (PS) 和多分散度指数 (PDI) , 重复3次。 2.3 qt-ns的稳定系数的测量 取适量QT-NS于2.0 m L EP管中, 转速1 500 r·min 2.4 qt-ts工艺参数的优化 2.4.1 bonzer效应的表面方法为qt-nit 本研究选择P188作为稳定剂, 单因素试验 (控制Zr O 2.4.2 模型调整 实验结果用Design-Expert 8.0.6软件进行二项式方程拟合, 并将各因素对Y 2.4.3 优化和预测工艺参数 根据回归方程, 绘制以PS, PDI, SI对自变量的三维效应面图, 结果见图1。由图1A可知, QT-NS的PS受Zr O 2.4.4 工艺验证 采用Design-Expert 8.0.6实验设计软件, 按Y 2.5 qt-ns的sem分析 取最优的QT-NS适量, 蒸馏水稀释后, 滴于锡箔纸上, 常温条件下放置, 挥干, 制备QT-NS的SEM样品, 于SEM下观察其形态并拍摄照片, 结果见图2。由图2可知, QT原料药大小不均匀, 呈较大的棒状和颗粒状;而QT的纳米粒呈大小均匀的不规则棒状, 粒径在200 nm左右。 2.6 zeta电位测定 室温下, 取QT-NS适量, 双蒸水稀释后, 测定其Zeta电位, 平行3次。测得Zeta电位为 (-23.90±9.39) m V, 结果见图3。 2.7 qt值测定的建立 2.7.1 对照溶液和阴性溶液的制备 精密称取QT对照品9.95 mg, 22%乙醇配制成39.80mg·L 2.7.2 测量波长的选择 取适量QT对照品储备液, 稀释为3.98 mg·L 2.7.3 标准曲线的制备 分别配制浓度为1.99, 3.98, 5.97, 7.96, 9.95 mg·L 2.8 qt-ns的制备方法 参照《中国药典》2015年版第四部附录释放度测定方法:分别取QT-NS、物理混合物混悬液、QT原料药混悬液各0.5 m L, 以22%乙醇为释放介质, 控制转速为50 r·min 3 累积释放度测定 文献报道 从体外累积释放度可知, QT原料药和物理混合物最大体外累积释放度只有35%左右, 而制备成NS后, QT的体外累积释放度在30 min时就能达到65%以上, 可见QT-NS体外累积释放度明显优于QT原料药和物理混合物。分析原因可能是:NS使药物的粒径减小, 表面积增大, 药物的渗透性增强, 从而使药物的饱和溶解度和溶出率都得到了提高 本研究中的实验器材容易获得, 操作方便, 而且节约原料药。总之, 本研究设计的微型化介质研磨技术, 可为纳米混悬剂的制备提供新的方法。