NY_T 1109-2017微生物肥料生物安全通用技术准则.pdf

ICS 65.080B 10NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1109—2017代替NY 1109-2006微生物肥料生物安全通用技术准则General biosafety standard for microbial fertilizers2018-06-01实施2017-12-22发布中华人民共和国农业部S发布 NY/T1109—2017前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替NY1109一2006《微生物肥料生物安全通用技术准则》。与NY1109—2006相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：修改了半数致死量（LDso）定义；修改了溶血试验的质控菌株要求修改了菌种安全分级目录；增加了急性经口毒性定义；增加了生产用菌种需做溶血试验的要求；一增加了植物病原菌不可用作生产菌种的要求；删除了引用标准GB/T4789.28。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：农业部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心、农业部微生物产品质量安全风险评估实验室（北京）、中国农业科学院农业资源与农业区划研究所。本标准主要起草人：姜昕、李俊、曹凤明、马鸣超、关大伟、李力、葛一凡、杨小红、冯瑞华本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-NY 1109—2006。I NY/T 1109—2017微生物肥料生物安全通用技术准则1范围本标准规定了微生物肥料生产用菌种安全性分级目录、不同菌种及产品选择毒理学试验的原则、程序、试验方法和结果评价方法。本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的微生物肥料。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB15193.3食品安全国家标准急性经口毒性试验3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1急性经口毒性acute oral toxicity次或在24h内多次经口给予实验动物受试物后，动物在短期内出现的毒性效应。3. 2半数致死量medianlethaldose（LDs）经口一次或24h内多次给予受试物后，能够引起动物死亡率为50%的受试物剂量，该剂量为经过统计得出的计算值。用每千克体重所摄入受试物质的毫克数或克数表示，单位为毫克每千克（mg/kg）或克每千克（g/kg）。4选择毒理学试验的原则4.1生产用菌种4.1.1总则微生物肥料生产用菌种分为四级管理，其安全分级目录见附录A，自主分离获得菌种应经专业权威机构鉴定。未列人附录A中的菌种，除根瘤菌和乳杆菌（Lactobacilus)外，其余均需做毒理学试验。所有生产用菌种均需要做溶血试验，植物病原菌不可用作生产菌种。采用生物工程菌，应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。4.1.2菌种安全分级第一级（A.1)为免做毒理学试验的菌种。第二级（A.2)为需做急性经口毒性试验的菌种。第三级（A.3)为需做致病性试验的菌种。第四级（A.4)为禁用菌种。4.2产品4.2.1除有机物料腐熟剂以外的固体微生物接种剂类产品均免做毒理学试验。4.2.2复合微生物肥料、生物有机肥和液体剂型微生物接种剂等需做急性经口毒性试验。1 NY/T1109—20175毒理学试验程序5.1菌种毒理学试验程序5.1.1应提供微生物肥料生产用菌种的鉴定资料，包括属及种的拉丁学名和中文译名、形态、生理生化特性及鉴定依据、功能评价等资料。5.1.2根据产品所含菌种的鉴定资料，按照附录A的规定，确定菌种安全级别、是否做毒理学试验及毒理学检测项目。5.1.3对于需要做毒理学试验的菌种，生产者需提供试验用纯菌种斜面，经复核确认与该菌种鉴定资料相符且无杂菌污染后，进行毒理学试验。5.2产品毒理学程序需对送检产品进行质量检测和载体物料的真实性确认后，进行毒理学试验。6试验方法6.1受试物的准备6.1.1菌种受试物将试验菌种接种于适宜的培养基中，在适宜的条件下培养一定时间，用生理盐水调整菌液浓度至2.0×10*CFU/mL~2.0×10°CFU/mL，该溶液为菌种受试物。6.1.2产品受试物固体产品根据试验要求，配制所需浓度，溶剂首选去离子水，也可选用羧甲基纤维素、明胶、淀粉等。液体产品不可稀释，直接使用。6.2急性经口毒性试验按GB15193.3的规定执行。6.3致病性试验项目6.3.1急性经口毒性试验按GB15193.3的规定执行。6.3.2一次破损皮肤刺激试验目的检测受试物对实验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度。实验动物每次实验至少需要3只皮肤完好的白色健康家兔或豚鼠。操作程序.1涂受试物前，将实验动物背部脊柱两侧的毛去掉，去毛范围约2.5cm×2.5cm，用75%酒精清洁、消毒暴露皮肤，待酒精挥发后，用灭菌刀片或注射针头分别在两块皮区内