SN_T 4519-2016出口动物源食品中利巴韦林残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4519—2016出口动物源食品中利巴韦林残留量的测定，液相色谱-质谱/质谱法Determination of ribavirin residue in foodstuffs of animal origin for export-LC-MS/MS method2016-06-28 发布2017-02-01实施中华人民共和国发布30国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4519—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国东山出人境检验检疫局、中华人民共和国厦门出人境检验检疫局、中华人民共和国绍兴出人境检验检疫局、福建圣农发展股份有限公司。本标准主要起草人：刘正才、杨方、潘迎芬、林永辉、陈旭东、徐敦明、任明兴、吕小玲 SN/T4519—2016出口动物源食品中利巴韦林残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了动物源食品中利巴韦林残留量的液相色谱-质谱/质谱的测定方法。本标准适用于鸡肉、肝脏、肾、蛋、猪肉、鳗鱼、虾等动物源食品中利巴韦林残留量的测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中残留的利巴韦林代谢物经酸性磷酸酯酶水解成利巴韦林原药，与样品中残留的利巴韦林原药一起，经三氯乙酸-乙晴混合溶液提取，经苯硼酸固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱进行测定，同位素内标法定量。4试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙：色谱纯。4.3甲酸：色谱纯。4.4三氯乙酸。4.5氨水：含量为25%~28%。4.6乙酸铵：色谱级纯。4.7酸性磷酸酯酶（phosphataseacid,fromwheatgerm，活力：≥0.4unit/mg，CAS号：9001-77-8）。4.8酸性磷酸酯酶溶液（100μg/mL）：准确称取酸性磷酸酯酶（4.7)5mg，置50mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成100μg/mL的酶解液，4℃～8℃冰箱中保存。4.99三氯乙酸溶液（20g/L，pH4.8）：称取20g三氯乙酸，加水约950mL使其溶解，用氨水调pH至4.8（±0.1)，再加水定容至1000mL。4.10PBA苯硼酸固相萃取小柱洗脱液，甲酸-水-甲醇溶液（体积比2：8：90）：准确量取2mL甲酸和8mL水加人90mL的甲醇中，混匀后备用4.11乙酸铵缓冲溶液（2.0mol/L，pH4.8）：称取乙酸铵77.0g，加水约450mL使其溶解，用乙酸调pH至4.8（±0.1），再加水定溶至500mL。4.12乙酸铵缓冲溶液（0.25mol/L，pH8.5）：称取乙酸铵9.06g，加水约450mL使其溶解，用氨水调pH至8.5（±0.1)，再加水定容至500mL。1 SN/T 4519—20164.13标准物质：利巴韦林（ribavirin；CAS号：36791-04-5），纯度大于98.0%。4.14同位素内标标准物质：利巴韦林-13C纯度大于99.0%。5标准储备液（100μg/mL）：准确称取利巴韦林标准品（4.13)10mg（精确至0.1mg），置100mL容4.15量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成100μg/mL的标准储备液，一18℃冰箱中保存，有效期为1年。4.16标准中间液（1.0μg/mL）：用移液管吸取标准储备液（4.15)1mL置100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀得到1.0μg/mL标准中间液，置4℃～8℃冰箱中保存，有效期为3个月拉4.17内标储备液：准确称取利巴韦林-13Cs标准品（4.14)10mg（精确至0.1mg），置100mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成100μg/mL的内标标准储备液，一18℃冰箱中保存，有效期为1年。4.18内标中间溶液（1.0μg/mL)：移取1.00mL的内标标准储备液（4.17)至100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，置4℃～8℃冰箱中保存，有效期为3个月。4.19标准工作液：临用时根据需要，移取适量的标准中间溶液（4.16)和内标中间溶液（4.18），用乙睛稀释至合适浓度，使用前配制。4.20PBA苯硼酸固相萃取小柱：100mg/3mL，或相当者；使用前依次用3mL乙腈，3mL乙腈-1%甲酸（体积比，3：1)，3mL乙酸铵缓冲溶