柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠的抗抑郁作用.docxVIP

柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠的抗抑郁作用 柴胡嘉隆谷煮牡蛎治疗（clsd）源于伤寒。根据小柴胡汤（xcd）的记载，它是由甘草和其他药物引起的。然后加入龙骨、牡蛎、桂枝、椰子和大黄。原书主治“伤寒八九日,下之,胸满烦惊,小便不利,谵语,一身尽重,不可转侧者”。全方寒温并用,攻补兼施,具有疏肝理气,通阳泄热,重镇安神之功,尤适用于病情错综复杂的证候。现今在临床上多用于抑郁症的治疗,被认为是最适合的古方之一。而小柴胡汤则鲜有用于抑郁症的报道。近年本实验室研究发现,柴胡加龙骨牡蛎汤对多种经典的抑郁动物模型均显示出抗抑郁作用,对抑郁大鼠脑内单胺递质具有明显的升高作用,并通过逆转HPA轴(下丘脑-垂体-肾上腺素)功能亢进发挥抗抑郁活性。为了研究柴胡加龙骨牡蛎汤全方、小柴胡汤以及非小柴胡汤部分(即龙骨、牡蛎、桂枝、茯苓、大黄)抗抑郁作用的差别,本实验采用慢性应激的方法造成大鼠抑郁模型,观察不同药物组成对慢性应激引起的动物行为的变化。 1 材料表面 1.1 不同种类植物的干酵母粉的制备 柴胡加龙骨牡蛎汤中各药材(去铅丹)均购自南京市金陵大药房,并经本校中药资源学研究室秦民坚博士鉴定:人参为五加科植物人参Panax ginsengC.A.Mey.的干燥根;桂枝为樟科植物肉桂Cinnamomum cassiaPresl的干燥嫩枝;半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb.) Breit.的干燥块茎;茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.) Wolf的干燥菌核;黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensisGeorgi的干燥根;柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinenseDC.的干燥根;大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatumL.的干燥根及根茎;甘草为豆科植物甘草Glycyrrhizga uralensisFisch.的干燥根及根茎;牡蛎Concha Ostreae;龙骨Fossilia Ossis Mastodi;姜为姜科植物姜Zingiber officinaleRosc.的根茎;大枣为鼠李科植物枣Ziziphus jujubeMill.的干燥成熟果实。 柴胡加龙骨牡蛎汤全方、小柴胡汤和龙骨、牡蛎、桂枝、茯苓、大黄方(龙牡桂苓军)均按原方比例配方。用10倍量水煎煮两次,合并滤液蒸干,制备成浸膏冻干粉,柴胡加龙骨牡蛎汤全方、小柴胡汤、龙骨牡蛎军的得率分别为16.9%、19.8%以及12.3%。各冻干粉放于-20℃冰箱里储存备用,临用时用蒸馏水配成所需浓度。 盐酸氟西汀胶囊(fluoxetine hydrochloride capsules, FLU)为加拿大奥贝泰克制药有限公司生产,批号HD0560。 1.2 动物 SD大鼠,♂,体重180~200 g,由中国药科大学实验动物中心提供。动物分笼饲养,保持昼夜节律,室温22±1℃,食水自由。 2 方法 2.1 动物模型转化 所有大鼠适应饲养7天后,用Open-Field法作行为学评分,选择得分相近的90只大鼠随机分为9组:正常组(Normal);模型组(Model);阳性药对照组(FLU,20 mg/kg);柴胡加龙骨牡蛎汤高、低(500、200 mg/kg)剂量组;小柴胡汤高、低(800、320 mg/kg)剂量组;龙牡桂苓军高、低(200、80 mg/kg)剂量组。除正常组外,其余各组均连续接受各种不同的应激以复制慢性应激抑郁模型。动物模型根据文献方法改进,每天随机选取以下应激中的任意一种:冷水游泳(4℃,5 min)、热应激(45℃,5 min)、禁水(24 h)、禁食(24 h)、夹尾(1 min)、水平摇晃(60 Hz,15 min)和昼夜颠倒等刺激,平均每种刺激各3次,使大鼠不能预料刺激的发生,以避免发生适应性。各组每日上午8时灌胃给药,连续 21 d,正常组和模型组给予等量蒸馏水。各组动物于d1、d7、d14、d21称量体重。 2.2 行为观察指标 2.2.1 运动运动得分 所有动物于d21灌胃后1~2 h,置于安静、黑暗的箱子里进行实验。水平运动得分:大鼠置于敞箱中央格,以穿越1格为1分(四爪均进入方格才计数);垂直运动得分:两前爪腾空或攀附墙壁次数。水平活动得分反映大鼠的运动活动性水平;垂直活动得分则反映其兴趣高低。 2.2.2 大鼠摄食蔗糖溶液量的检测 所有大鼠于实验d19起禁食水 24 h(期间灌胃1次),于d20予食物及1%蔗糖水溶液 200 mL,观测大鼠在 24 h 内的饮用蔗糖水溶液量。比较正常组大鼠、模型组以及各给药组大鼠在糖水消耗及糖水偏爱方面的差异。 糖水偏爱(Sucrose Preference,SP)以蔗糖水溶液的消耗量(mL)/总液体的消耗量(mL)×100%表示。