白细胞介素－1β和基质金属蛋白酶－9在糖尿病性白内障中的表达和意义.docVIP

实用医学杂志2011年第27卷第22其 4089 白细胞介素-1β和基质金属蛋白酶-9在糖尿病性 白内障中的表达和意义 李青春 蔡小军 李岱 摘要 目的：探讨白细胞介素-1β(interleukin- 1β,IL- 1β) 和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase. 9,MMP-9) 在糖尿病性白内障晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)中的表达及意义。方法用免疫组织 化学技术检测IL-1β及 MMP-9 在糖尿病性白内障(30例)和无糖尿病的年龄相关性白内障(30例)晶状体上 皮细胞中的表达。结果 IL-1β与 MMP-9 在糖尿病性白内障 LEC 中的表达显著高于在无糖尿病的年龄相关性 白内障LEC 中的表达 (P0.01),Ⅱ-1β 和 MMP-9 随白内障程度的增加阳性表达逐渐增高 (P0.05), 且在 糖尿病性白内障 LEC 中 IL-1β与 MMP-9 正相关(r=0.576,P0.01)。 结论：IL-1β和 MMP-9 在糖尿病性白内 障的发生和发展中均有重要作用。 关键词 白内障； 金属蛋白酶类； 白细胞介素-1β 糖尿病性白内障是糖尿病并发症中仅次于糖 尿病视网膜病变的第2大眼病，近年来随着糖尿病 发病率的提高，糖尿病性白内障也成为临床的一种 常见病，但其发病的分子生物学机制至今仍不明 确。本研究应用免疫组化技术检测糖尿病性白内障 和无糖尿病的年龄相关性白内障各30例的术后晶 状体前囊膜 LEC 中 MMP-9 及 IL-1β的表达，旨在 探讨MMP-9 及 IL-1β在糖尿病性白内障发生和发 展中的作用及其相互关系。 1 资料与方法 1.1 一般资料 实验组(A 组),30例(30眼)糖尿 病性白内障患者，男19例(19眼),女11例(11 眼),年龄55～75岁，平均(67.97±6.42)岁。均为 内科确诊的2型糖尿病患者，血糖7 .8～23 . 7 mmol/L, 尿糖+以上，病程5～15年；经内科保守 治疗，血糖控制在8.3 mmol/L 以下，尿糖转阴。既 往无眼外伤或其他重要眼部疾患；对照组(B 组): 30例(30眼)均为无糖尿病的年龄相关性白内障患 者，男13例(13眼),女17例(17眼),年龄55～75 岁，平均(67.53±5.73)岁，既往无眼部疾患。两组 年龄差异无统计学意义(P=0.784)。 1.2 实验方法60例患者均在术前散瞳后由笔者 裂隙灯检查并记录晶状体混浊程度并按文献[1]将 糖尿病性白内障的发展程度分成 I～IV 期，且由同 一术者完成白内障超声乳化手术，术中前房内注入 黏弹剂(Healon),行连续环形撕囊，直径约6mm。 doi:10.3969/j.issn.1006-5725.2011.22.04 作者单位：437100 咸宁学院五官医学院眼科(李青春，李 岱);430071 武汉大学中南医院眼科(蔡小军) 通信作者：蔡小军 E-mail:caiyang@public.wh.hb.en 取下的前囊膜组织(细胞面朝上)立即平铺于涂有 多聚赖氨酸的玻片上，并平分为2份，10%的冷甲 醇固定5 min。每份同时分别做MMP-9 及 IL-1β检 测。免疫组化步骤按SP 试剂盒操作。兔抗人 MMP- 9多克隆抗体，兔抗人多克隆IL-1β抗体及SP 试 剂盒均购自北京中杉生物试剂公司。以PBS 代 替 一抗作为阴性对照，阳性对照为购自北京中杉生物 试剂公司的标准阳性对照片。 1.3 结果判定 胞内有呈棕黄色颗粒的为阳性细 胞。采用HPIAS.1000 型高清晰度彩色病理图文分 析系统作IL-1β和 MMP-9 表达的半定量分析。在 同一光强度、放大倍数下，每张切片随机选取5个 视野，对切片上免疫组织化学阳性染色进行测定。 选择阳性染色范围内每个像素的吸光度均值(平均 吸光度A 值)作为参数，IL-1β、MMP-9 表达量与 A 值成正比。 1.4 统计学处理 实验数据以x±s 表示，运用 SPSS 13.0统计软件分析，采用 One-Way-ANOVA 法对计量资料进行单因素方差分析，同一分期两组 间比较采用独立样本资料的t检验，相关分析采用 Pearson 相关分析。 2 结果 2.1 裂隙灯显微镜检查结果 A 组 I～IV 期例数 分别为0、4、11、15,B 组 I～IV 期例数分别为0、3. 16、11。 2.2IL-1β 蛋白表达 A 组 LEC 细胞浆中可见棕 色颗粒均匀分布，表明IL-1β表达较多，B 组