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蓝藻细胞对光照度的响应 蓝藻通过混合假细胞的组成和破裂以及碳氢化合和消耗来调整水体的垂直位置。而光照度的变化直接影响蓝藻光合作用的强弱,进而影响蓝藻细胞内的碳水化合物含量。所以,光照度的变化将直接影响到蓝藻在水体中的垂直分布。 笔者通过摇瓶和水柱试验研究了蓝藻细胞胞内碳水化合物含量及蓝藻在水体中的垂直分布对光照度变化的响应,以期为蓝藻水华污染控制提供借鉴。 1 材料和方法 1.1 藻类繁殖 1.1.1 bg11的引加方法 取某微囊藻水华湖泊中的藻液适量,将其加入上海交通大学思源湖野外围隔试验区内,投加氮源(硝酸钠)、磷源(磷酸二氢钾)及BG-11培养基中的A5微量溶液、 Co溶液,培养15 d。水柱试验前,通过显微镜观察确定藻液中主要成分为铜绿微囊藻(群体)。 1.1.2 摇瓶试验蓝藻藻种 摇瓶试验采用铜绿微囊藻(Microcystis aeraginosa)、水华鱼腥藻(Anabaena flosaquae)。试验前,将铜绿微囊藻、水华鱼腥藻藻液与BG-11培养基分别按1∶50(体积比)混合,扩大培养7 d后,分别取一定体积的藻液以3 000 r/min离心15 min,弃掉上清液,用15 mg/L 的NaHCO3溶液洗涤后再离心,重复3次,所得藻液用无菌水稀释后饥饿培养48 h,备用。 1.2 夜间温度设置 水柱、摇瓶试验均在人工气候室中进行,设定昼夜时间比为1∶1(即各为12 h),白天温度设置为28 ℃,夜间温度设置为25 ℃。试验周期均为24 h。 1.2.1 水面深度对藻细胞颗粒内碳、叶绿素a、碳水化合的影响 采用高为0.95 m、直径为0.10 m的有机玻璃柱,用黑色遮光纸完全遮光,一次性加入铜绿微囊藻藻液,在水面光照度为0(无光照,下同)、5 000、20 000、50 000 lx下进行试验。沉降0、1、4、9、15、20、24 h后,分别在距离水体表面深度为0、20、35、75、90 cm处取样,检测藻细胞胞内碳水化合含量、藻细胞数、叶绿素a含量。每批试验所用的藻液随机选取,初始藻细胞数略有不同。 1.2.2 藻细胞胞内分析方法 在250 mL摇瓶分别加入150 mL铜绿微囊藻和水华鱼腥藻藻液,在水面光照度为0~20 000 lx下进行试验,设2组平行样。0、3、7、12、15、24 h后,检测藻细胞胞内碳水化合物含量、藻细胞数和叶绿素a含量。其中,碳水化合物含量用酚/硫酸法测定。 2 结果与讨论 2.1 光照度对藻细胞数的影响 水柱试验中,不同光照度下铜绿微囊藻的垂直分布情况见图1。由图1可知,在无光照和5 000 lx的光照度下,铜绿微囊藻出现明显的表面浮聚现象。当无光照时,沉降4 h后表层(0 cm处)藻细胞数由3.60×105个/mL增加至8.10×105个/mL;沉降24 h后藻细胞数又增加至4.85×106个/mL;而在20、35、75、90 cm处,沉降24 h后的藻细胞数均不足起始时的50%。在20 000、50 000 lx的光照度下,铜绿微囊藻出现下沉趋势。当光照度为50 000 lx时,沉降15 h后底层(90 cm处)藻细胞数由5.50×105个/mL增加至1.48×106个/mL,而表层藻细胞数则下降到2.00×105个/mL。 刘春光等对水华围隔内藻类生物量垂直分布观察发现,水华围隔内藻类生物量随深度增加而降低。梁瑜等研究发现,遮光围隔中藻类会出现明显的表面浮聚现象。本水柱试验中,无光照和5 000 lx的光照度下,铜绿微囊藻出现明显的表面浮聚现象,沉降24 h后,表层的藻细胞数分别占藻细胞总数(由藻细胞数密度乘以藻液体积而得)的47%和26%,这给遮光控藻技术以启示,即如果能够通过水流隔板等物理方法去除表层藻类,则将大幅降低被遮光水体中的藻类生物量。 2.2 光照对铜绿微囊藻胞理化指标的影响 水柱试验中,在不同光照度下,沉降1、24 h后表层和底层铜绿微囊藻胞内碳水化合物含量的变化见图2。由图2可知,在不同光照条件下,铜绿微囊藻胞内碳水化合物含量都呈现出表层低、底层高的现象;沉降24 h后,表层铜绿微囊藻胞内碳水化合物质量浓度为3×10-6~5×10-6μg/个(水柱试验中,由于玻璃柱周边遮光,藻细胞中的叶绿素a含量很难精确检测,故此处以每个藻细胞内碳水化合物质量计),而底层铜绿微囊藻胞内碳水化合物质量浓度则为9×10-6~11×10-6μg/个。 2.3 不同光照度下藻细胞胞内有机碳的含量变化 摇瓶试验中,不同光照度下,2种藻细胞胞内碳水化合物含量的增减变化情况见图3。 由图3可知,在0~10 000 lx的光照条件下,光 照度的提高能够促进水华鱼腥藻胞内碳水化合物的累积。当光照度为10 000 lx时,试验12 h后,水华鱼腥藻胞内碳水化合物增加了26.4 μg/μg(以