DB35T 1554-2016鸭和鹅致病性大肠杆菌病诊断技术规范.docxVIP

ICS 11.220 B41 福 建 省 地 DB35 方 标 准 DB 35/T 1554—2016 鸭和鹅致病性大肠杆菌病诊断技术规范 Diagnostic technical protocol for pathogenical colibacillosis of duck and goose 2016 - 04 - 06 发布 2016 - 07 - 06 实施 福建省质量技术监督局 发 布 I DB35/T 1554—2016 前 言 本标准是根据GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第一部份： 标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由福建出入境检验检疫局提出并归口。 本标准起草单位：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心、福建省农业科学院畜牧兽医研究所。 本标准主要起草人：郑腾，程龙飞，张体银，黄瑜，李宋钰，傅光华，唐寰宇，施少华，王武军， 陈红梅，白泉阳，万春和，傅秋玲，张志灯。 1 DB35/T 1554—2016 鸭和鹅致病性大肠杆菌病诊断技术规范 1 范围 本标准规定了鸭和鹅致病性大肠杆菌病的临床诊断和实验室诊断技术。 本标准适用于鸭和鹅致病性大肠杆菌病的诊断。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 3 疾病概述 3.1 病原 鸭和鹅的致病性大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的全身或局部感染的一种细菌性传染病， 该病 的病原为埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli) ，是肠杆菌科(Enterobacteriaceae) 埃希氏菌属 (Escherichia) 的代表种，俗称大肠杆菌。 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽胞杆菌， 根据O(耐热菌体抗原) 、 H(不耐热鞭毛蛋白)、K(菌体表面的热不稳定抗原)、F(菌毛抗原) 四种抗原来进行血清分型，其 中O血清型是对大肠杆菌进行分类的主要依据之一，而O78血清型为鸭鹅致病性大肠杆菌的主要血清型。 3.2 流行病学 大肠杆菌病呈全球性分布， 各种血清型大肠杆菌是正常动物肠道内的定居菌群， 其中有部分属于潜 在致病菌。自然条件下，鸭和鹅从胚胎到成年均可感染发病，但以中小日龄感染引起的死亡比较常见。 该病一年四季均有发生， 但以低温、阴雨潮湿的季节较为多见。潜伏期的长短与菌株的毒力、感染途径 及应激等因素有关。急性发病在几天内大量死亡，慢性病例可拖延十余天甚至更长时间。 4 临床诊断 4.1 临床症状 4.1.1 消瘦，腹部膨胀，排黄白色稀粪，表现神经症状(如共济失调或头颈震颤) 。 4.1.2 关节肿胀、跛行。 4.1.3 受精卵孵化过程中出现大量胚胎死亡。 4.1.4 雏禽出壳后精神不振，脐部膨胀，局部充血。 2 DB35/T 1554—2016 4.1.5 产蛋率下降。 4.2 病理变化 4.2.1 心包积液，心包膜增厚，表面覆盖一层灰白色渗出物，心包与胸骨粘连。 4.2.2 肝脏表面覆盖一层淡黄色或灰白色假膜。 4.2.3 气囊表面有淡黄色干酪样物沉积。 4.2.4 整个腹腔被渗出物粘连。 4.2.5 十二指肠、盲肠、回肠、肝脏和肠系膜等处出现大小不等、灰黄色肿瘤样结节。 4.2.6 脑膜及实质有小出血点。 4.2.7 关节囊内有黄白色粘性或脓性或干酪样分泌物。 4.2.8 脐部肿大，卵黄吸收不良或附着炎性分泌物，味恶臭。 4.2.9 产蛋期输卵管膨胀，管壁变薄，管壁内附有单个或大量干酪样渗出物，渗出物呈叠层状，其中 心为带有卵壳或卵壳膜的蛋， 并伴有恶臭， 卵泡粘连， 腹腔内积聚渗出物， 初期呈液体状， 粘稠， 后期 渗出物变干，类似于卵黄将内脏粘连。 4.3 初步诊断 当鸭和鹅出现以上临床症状和病理变化时，应进行实验室诊断。 5 实验室诊断 5.1 设备、材料和试剂 5.1.1 设备 5.1.1.1 5.1.1.2 5.1.1.3 5.1.1.4 5.1.1.5 5.1.1.6 5.1.1.7 5.1.1.8 5.1.1.9 培养箱(37 ℃±1 ℃) 。 高速冷冻离心机。 独立送风隔离笼具(IVC)。 振荡摇床(37 ℃±1 ℃)。 水浴锅。 微量可调移液器。 PCR 仪。 电泳仪。 紫外凝胶成像系统。 5.1.2 材料和试剂 3 DB35/T 1554—2016 5.1.2.1 5.1.2.2 5.1.2.3 5.1.2.4 5.1.2.5 5.1.2.6 5.1.2.7 5.1.2.8 5.1.2.9 麦康凯琼脂平板，配制