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盐源山蛭抗凝血多肽的分离与纯化 血郁病的心脑血管疾病已成为人类健康和生存的大敌。世界各国都在大力推广人和物质，促进、控制和研究抗凝剂。水硫是天然抗凝剂的重要来源之一。盐源山府是一种陆生蚱。不同来源的抗凝剂可以通过不同的方法分离和提取，离子交换层析和分子筛选凝胶过滤是分离生物因素的有效方法。在这项工作中，我们使用dea-c52（阴离子交换纤维）离子交换法和清热条件海蓬（葡萄糖）的凝胶过滤方法来提取盐源山府的抗凝剂。 1 材料和方法 1.1 凝血酶mema 将盐源山蛭断头, 并将头部和尾部分别立即置于液氮 (-196℃) 中冷冻处理后, 贮于-70℃备用;DEAE-C52购自美国Whatman公司;Sephadex G50、凝血酶、HEPES (N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸钠) 购自美国Sigma公司;凝血酶的发色底物S-2238购自瑞典CHROMO-GENIX公司;牛血清白蛋白购自中国医学科学院血液研究所. 1.2 研磨法epes 取100只盐源山蛭的头部, 置于5mL HEPES缓冲液 (10mmol·L-1CaCl2, 20mmol·L-1HEPES, pH7.8) , 于4℃研磨匀浆, 后经超声粉碎6min, 匀浆液经8500g离心25min (4℃) , 收集上清液;将沉淀再次用HEPES缓冲液溶解后, 8500g离心25min (4℃) , 将2次高速离心所获上清液