DB37T 4298—2020绿潮次生毒性的快速检测方法　发光细菌法.pdfVIP

ICS 07.060 CCS A 45 37 山 东 省 地 方 标 准 DB37/T 4298—2020 绿潮次生毒性的快速检测方法 发光细菌 法 Rapid determination for secondary toxicity of green tide—Luminescent bacteria method 2020 - 12 - 30 发布 2021 - 01 - 30 实施 山东省市场监督管理局 发 布 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省海洋局提出并组织实施。 本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：山东省海洋资源与环境研究院、山东省标准化研究院。 本文件主要起草人：宋秀凯、付萍、张秀珍、刘晓波、刘爱英、姜会超、何健龙、程玲、于广磊、 杨沣江。 绿潮次生毒性的快速检测方法 发光细菌法 1 范围 本文件规定了以一种发光细菌-费氏弧菌（Vibrio fischeri）为受试生物的绿潮次生毒性快速检测 与毒性水平评价方法。 本文件适用于绿潮发生海域绿潮藻腐烂液次生毒性的检测。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 绿潮次生毒性 secondary toxicity of green tide 绿潮藻腐烂分解产生的物质对生态环境产生的影响及损害的能力。 3.2 光抑制率 light inhibition rate 水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后，发光细菌的发光量降低的百分比。 3.3 光增益率 light gain rate 水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后，发光细菌的发光量增加的百分比。 3.4 半数效应浓度 median effect concentration 样品在一定的时间和条件下与发光细菌接触后，发光细菌的发光量减少50 %时的样品浓度。 3.5 水合 reconstitution 处于冷藏环境的发光细菌冻干粉加入一定量的稀释剂恢复至活性。 3.6 水合时间 reconstitution time 添加稀释剂的发光细菌恢复至活性所需要的时间。 3.7 反应时间 reaction time 恢复至活性的发光细菌与对照样本或者待测样本接触的时间。 4 方法原理 发光细菌在一定实验条件下的发光强度是稳定的。在一定绿潮次生污染物范围内，发光细菌接触样 品后的发光强度与样品的急性毒性水平呈显著负相关（P≤0.05），通过分析仪测定细菌发光强度的变 化以表示样品的急性毒性水平。 5 试剂与材料 5.1 发光细菌冻干粉 本文件使用的发光细菌菌株为费氏弧菌（Vibrio fischeri NRRL B-11177）。冻干粉应在-20 ℃～ -25 ℃储存，4 ℃时，保存时间不超过4周；22 ℃时，不超过24 h。 5.2 稀释剂 稀释剂为2 %氯化钠溶液，用作水合发光细菌冻干粉、稀释样品以及无毒对照样本。2 ℃～8 ℃保存。 宜选用与冻干粉相应的稀释剂。 5.3 参比毒物母液 称取0.05 g七水合硫酸锌（ZnSO •7H O、分析纯）溶解于稀释剂中，定容至500 mL，即为参比毒物母 4 2 液（100mg/L）。母液密封4 ℃保存