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漂浮育苗条件下接种丛枝菌根真菌对烟株农艺性状、青枯病抗性及烤后烟叶品质的影响
0 菌根生物技术
[研究意义]牧草是我国重要的耕作种类,卷烟生产在中国经济中发挥着重要作用。然而,严重的蓝色斑点是一种严重的有害疾病,通常发生在热带和亚热带地区,危害非常严重。烟草青枯病是由青枯雷尔菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种土传细菌性病害,主要侵染烟株根部,从而使烟株枯萎,其在高温多雨的天气中易于发生。近年来,此病在我国云南、广东、广西、湖南、福建等地普遍发生(卢燕回等,2007;陈瑞泰等,1997)。一直以来,对该病的防治主要以化学药剂为主(Guo et al.,2004),但长期大量使用化学药剂不但使病菌产生抗药性和造成环境污染,而且破坏了土壤微生态平衡,致使烟叶品质逐年下降。因此,生物防治技术在烟叶生产中越来越受到国内外研究者的高度重视(邓接楼等,2007)。丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungus,简称AM真菌)是自然界和农业生态系统中分布最广的一类内生菌根,在自然界中分布极其广泛,能与陆地上80%以上的植物形成菌根(Smith and Smith,2007),可以不同方式或途径影响植物的许多代谢过程。【前人研究进展】接种优良AM真菌不仅能够促进寄主植物的生长,改善植株营养状况,尤其是磷素营养,增强植物抗逆性和抗病性,提高产量和品质等(李晓林和冯固,2001;江龙等,2009;刘延荣等,1997;刘江等,1999),而且可以在一定程度上改良土壤结构、减轻环境污染。Yao等(2002)和朱红惠等(2004)研究均表明,接种AM真菌能抑制病原微生物,提高马铃薯及番茄青枯病抗病能力。可见,菌根生物技术在可持续农业生产中有广阔的应用前景。【本研究切入点】烟草为茄科(Soiamcese)烟属(Nicotiana),是AM真菌共生植物之一,然而,菌根烟苗移栽后,能否发挥菌根效应,提高烟株抗病性和改善烟株营养等方面报道甚少。【拟解决的关键问题】拟选取优势AM真菌接种烟草幼苗根系,在大田试验中检验菌根苗的生长发育情况、青枯病抗病效果和化学成分含量变化等指标,旨在探明AM真菌对烟草的微生物作用效果,为AM真菌应用于优质烟叶规范化生产提供理论基础和技术支持。
1 材料和方法
1.1 植物营养与环境
供试烤烟品种为K326(Nicotiana tabacum L.K326),由湖南省郴州市烟草公司提供。聚丛球囊霉(Glomuse aggregatum,BGCHUN02D)和摩西球囊霉(Glomuse mosseae,BGCHUN01A)均由北京市农林科学院植物营养与资源环境研究所提供。
菌根烟苗的培育:在漂浮育苗条件下,播种期分别接种聚丛球囊霉(Glomuse aggregatum,BGCHUN02D)和摩西球囊霉(Glomuse mosseae,BGCHUN01A),培养液养分用量为1.2×Hoagland,由低到高,分次供应,成苗期镜检AM真菌侵染率≥25%。
非菌根烟苗的培育:在漂浮育苗条件下,播种期接种等量灭活接种物,培养液养分用量为1.2×Hoagland,提供方式同菌根烟苗的培育,成苗期镜检未发现菌根结构。
1.2 试验土壤
供试土壤取自郴州市桂阳县汪山烟草试验站试验基地,其基本理化性状见表1。
1.3 球囊霉种苗的处理
试验安排在郴州市烟草公司烟科所试验基地进行,设5个处理,3次重复,共计15个小区,每小区面积66.7 m2,随机区组排列,4周设保护行,所有处理在移栽当天每株100 m L淋蔸。种植密度按当地烟区12500株/ha,正常田间管理。
处理T1:接种摩西球囊霉的菌根苗;T2:接种聚丛球囊霉的菌根苗;T3:接种摩西球囊霉的菌根苗+生防制剂20 m L;T4:接种聚丛球囊霉的菌根苗+生防制剂20 m L;CK:对照。
1.4 测量设计和方法
1.4.1 凋涣或茎组
病情分级标准参照方树民等(方树民等,2001)的方法,0级:烟株无病;1级:烟株基部少数叶片发病,轻度凋萎或基部偶有褪绿条斑;2级:烟株中下部多数叶片发病凋萎或茎基部有明显的黑色条斑;3级:烟株2/3以上叶片发病凋萎或茎基部黑色条斑扩展到顶部;4级:全株凋萎或死亡。
分别于团棵期和旺长期观测烟株感病状况并进行病理分析,按照烟草青枯病分级标准调查各小区的病株数,计算发病率、病情指数及防治效果等。
发病率(%)=发病株数/调查总株数×100
病情指数=∑(级数×该级数发病株数)/(调查总株数×最高级数)×100
防治效果(%)=(对照区病情指数-处理区病情指数)/对照区病情指数×100
1.4.2 最大叶面积、烟碱、总糖含量的测定
全生育期3次采样,依次为:团棵期,旺长期,成熟期。每小区取3蔸。农艺性状测定有效叶数、叶
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