马铃薯不同品种试管苗诱导结薯的研究.docx

马铃薯不同品种试管苗诱导结薯的研究 通过集体培训，将脱毒试管苗放入容器中，经过一定程度的培训，形成直径为2.10mm的小型甘薯过程。试管薯具有种性纯、繁殖快、体积小、便于贮藏和运输, 以及能够常年规模化生产等特点, 被广泛应用于基因工程研究、种质资源保存与交换运输及脱毒种薯生产等领域。不同培养条件对试管薯的形成有较大影响。目前对马铃薯试管薯诱导条件、诱导调节剂等方面的研究较多, 而对不同品种试管苗的结薯能力的研究较少[1~5]。 1 材料和方法 1.1 供试品种及培养基 供试马铃薯品种为陇薯3号、大西洋、费乌瑞它、夏波蒂、中薯3号, 各供试品种的试管苗由陇东学院农林科技学院生物技术实验室提供, 诱导培养基为MS培养基+80 g/L白沙糖+15 g/L活性碳。 1.2 测试方法 1.2.1 固体培养基培养 将带有4~5个茎节的试管苗在无菌条件下切成单节茎段, 转接到盛有30 m L固体培养基 (MS+3%白沙糖+4 g/L琼脂, pH为5.8) 的培养瓶中, 在温度为 (25±2) ℃, 光照为16 h/d的条件下培养20 d, 待试管苗长至5个茎节时待用。 1.2.2 材料和培养条件 在无菌条件下, 将培养瓶内残余培养基弃去, 留壮苗整株转接到诱导结薯培养基 (MS+80 g/L白沙糖+15 g/L活性碳+4 g/L琼脂, pH为5.8) 上, 每品种接100瓶, 每瓶接入2株, 在光照为2 000 Lx, 温度为 (25±2) ℃的环境条件下培养。 1.2.3 测定每个试薯单、单薯重 诱导培养30 d后统计试管薯诱导率, 每隔10 d统计1次, 共计3次, 每次随机统计20瓶, 重复3次。60 d后收获直径大于3mm以上的试管薯, 统计最大、最小薯单薯重 (重量大于0.15 g为最大薯, 小于0.05 g为最小薯) , 再随机取30个试管薯统计平均单薯重, 重复3次。 试管薯诱导率 (%) = (小薯试管苗/接种总苗数) ×100 2 结果与分析 2.1 不同马铃薯试苗诱导结薯 从图1可以看出, 在无外源激素的情况下, 用MS培养基+80 g/L白砂糖+15 g/L活性碳+4 g/L琼脂进行马铃薯试管苗诱导结薯, 不同品种间诱导率差异较大。诱导培养30~60 d后, 各品种的诱导率均呈明显上升趋势, 经方差分析均达极显著差异水平。诱导培养60 d后, 以中薯3号的诱导率最高为59%, 其次为费乌瑞它、大西洋、陇薯3号, 诱导率分别为56%、49%、39%, 夏波蒂最低, 为33%。诱导结薯盛期在转接后的40~60 d内。 2.2 最大单薯重 从表1可以看出, 在参试的5个品种中, 平均单薯重以陇薯3号最大, 为0.081 g, 其次是费乌瑞它、中薯3号、夏波蒂, 平均单薯重分别为0.080、0.076、0.074 g, 大西洋最小, 为0.070 g。最大单薯重以中薯3号最大, 为0.270 g, 其次是陇薯3号、夏波蒂、大西洋, 分别为0.250、0.220、0.200 g, 费乌瑞它最小、为0.180 g。最小单薯重以大西洋最大, 为0.026 g, 其次是陇薯3号、夏波蒂、费乌瑞它分别为0.025、0.024、0.023 g, 中薯3号最小, 为0.020 g。平均单薯重陇薯3号与费乌瑞它之间差异不显著, 中薯3号与夏波蒂之间差异达显著水平, 其它品种之间差异达极显著水平。 3 马铃薯试剂苗诱导结薯能力 1) 采用MS培养基+80 g/L白砂糖+15 g/L活性碳, 在无外源激素的情况下, 能够诱导马铃薯试管苗结薯, 其诱导结薯盛期在转接后的40~60 d内。 2) 不同品种马铃薯试管苗诱导结薯能力不同, 品种间差异较大。诱导培养60 d后的诱导率从大到小依次为中薯3号、费乌瑞它、大西洋、陇薯3号、夏波蒂。不同品种诱导试管薯的平均单薯重从大到小依次为陇薯3号、费乌瑞它、中薯3号、夏波蒂、大西洋。最大单薯重从大到小依次为中薯3号、陇薯3号、夏波蒂、大西洋、费乌瑞它。最小单薯重从大到小依次为大西洋、陇薯3号、夏波蒂、费乌瑞它、中薯3号。