严重急性呼吸综合征患者尸解肺标本病理改变和致病机制的研究.docxVIP

严重急性呼吸综合征患者尸解肺标本病理改变和致病机制的研究 严重的急性呼吸综合征（ss）是一种严重的人类疾病之一。Peiris等采用病毒培养、血清免疫学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法研究发现SARS患者的鼻咽分泌物和血清标本,存在一种新型的冠状病毒,故于2003年4月8日提出这种新型的冠状病毒可能是SARS的病因,并根据Koch原则和猴接种实验,于4月16日得到WHO的正式确认,命名为SARS相关冠状病毒(SARS-CoV)。然而,SARS-CoV的致病机制仍不清楚。为了进一步了解SARS的病理改变和致病机制,我们对6例SARS患者的尸解肺标本进行了深入的研究。 中心病例治疗 病例的选择标准:6例尸解病例(2003年4—7月)都符合WHO制定的SARS确诊标准, 包括发热(体温≥38℃)、咳嗽或气短,胸片示新近出现的肺内阴影,以及与SARS患者有接触史或广谱抗生素治疗无效。血清学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示6例患者中有4例新近感染过SARS冠状病毒。 患者的临床情况:6例尸检患者男性5例,女性1例。年龄分别为51、50、31、49、24和58岁,平均43.8岁。病程(发热到死亡时间)分别为44、47、55、35、33和90 d,平均50.7 d。除1例因患精神分裂症未用激素治疗,其余5例均曾应用激素治疗。 研究方法:6例SARS患者的尸解肺标本被分成4块:1块作病毒学研究,1块-70℃冰箱保存,1块用4%的中性甲醛固定,1块用2.5%的戊二醛固定以用于透射电镜检查。采用光镜和电镜观察肺标本。免疫组织化学染色采用EnVision方法。甲醛固定、石蜡包埋的肺组织以4 μm的厚度切片,并逐级脱蜡。分别染AE1/AE3(角蛋白,1∶50)、CD3(T细胞,1∶50)、CD68(巨噬细胞,1∶50)、CD20(B细胞,1∶50)、CD45RO(T细胞,1∶50)、平滑肌肌动蛋白(SMA,1∶50)、Ⅰ和Ⅲ型胶原(1∶50),均为Dako公司生产的单克隆抗体。采用Ventana Nexes 自动免疫组织化学染色仪进行染色。 此外,对肺组织还进行了Masson三色染色。 免疫组织化学染色 患者的肺标本的病理形态改变总结如下。 1.6例患者均存在双肺弥漫性实变病灶,伴双肺重量增加(1355~2226 g)。肺明显水肿,切面可见灰白色实变区。病灶不规则,呈斑片状,直径从几毫米到几厘米。支气管管腔内可见黏液脓性渗出物。 2.6例患者均有弥漫性肺损伤性病变,包括透明膜形成(图1)、肺泡腔内水肿(水肿液呈颗粒状或空泡状)/出血、纤维素沉积和肺泡上皮细胞脱屑。采用AE1/AE3免疫组织化学染色显示肺泡上皮的完整性明显破坏(6/6)。 3.部分轻度增生的肺泡Ⅱ型上皮细胞有一定异型性,细胞体积增大,胞质呈双染性,颗粒状,胞核增大,单核、双核、多核,空泡状,有明显核仁,核形不规则,胞质内可见细小空泡聚集和玻璃样变性的小体形成(5/6),并被AE1/AE3免疫组织化学染色所证实(图2)。 4.6例患者中有5例的肺泡腔内可见巨细胞形成(图3),这些巨细胞大多AE1/AE3免疫组织化学染色阳性(5/6),少数CD68染色阳性(2/6)。 5.CD68免疫组织化学染色显示6例患者的肺泡腔内和肺泡间隔内的巨噬细胞明显增多(6/6)。此外,5例患者可见巨噬细胞噬红细胞象(5/6、图4)。然而,除了1例肺组织中浸润的淋巴细胞较多外(患者未接受激素治疗),其他5例肺中浸润的淋巴细胞很少。 6.6例患者中有5例可见明显的肺纤维化(5/6),包括肺泡间隔和肺间质明显增厚(5/6),肺泡内渗出物机化(成纤维细胞栓或肾小球样小体形成)(6/6)和胸膜增厚(4/6)。这些成纤维细胞栓呈细长形或肾小球样,表现为淡染的基质中散在少量梭形或星形的成纤维细胞(图5)。Masson三色染色显示胶原纤维增生(图6),免疫组织化学染色证实大多数胶原纤维为Ⅲ型胶原,而Ⅰ型胶原纤维染色非常弱。光镜和免疫组织化学染色证实5例患者有显著的成纤维细胞/肌纤维母细胞增生灶形成(5/6),表现为黏液样细胞外基质中可见弥漫散在或小灶状的成纤维细胞和肌纤维母细胞聚集,并被SMA免疫组织化学染色所证实。 7.5例患者可见支气管黏膜的鳞状上皮化生(5/6),所有患者肺小血管内均可见纤维素性微血栓形成(6/6),甚至部分患者较大的肺血管内亦可见血栓形成。2例患者伴有其他病原体感染,一例是细菌感染,另一例是真菌感染。 此外,电镜显示患者肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞的胞质内和扩张的细胞器内可见直径约100 nm的圆形或椭圆形冠状病毒样颗粒,病毒颗粒的表面有特征性的放射冠。 mems—讨论 6例SARS患者的病理形态改变显示SARS肺病变的本质是弥漫性肺泡损伤(DAD)。感染性因素可以导致DAD(尤其是