山楂和山楂汁对高脂血症大鼠血清脂质和肝脏脂水平的影响.docxVIP

山楂和山楂汁对高脂血症大鼠血清脂质和肝脏脂水平的影响 随着生活水平的提高，人们的食物中的脂含量增加。在一些人中，脂含量超过了总能量的30%。目前高脂膳食已是高脂血症的明确的危险因素。大量的调查和研究均表明,高脂血症是威胁人类健康的一个重要因素,现认为调节血清脂质水平可降低冠心病死亡和缺血性心脏事件(心梗,猝死,不稳定性心绞痛等)的发生率。因此,通过天然食物来调节血脂以预防高脂血症所引起的疾病,已成为当前医疗保健研究的热点。 山楂中含有多种活性成分,如黄酮类化合物,有机酸、膳食纤维和固醇等。由于山楂是目前调节血脂的保健品中使用频率最高的一种,而黄酮类化合物的药理研究也显示降血脂作用,因此人们考虑山楂中降血脂的主要功效成分为山楂黄酮。但大多数山楂降脂研究都采用山楂水煎剂或粗的醇提物,对于这些提取物中主要成分并未做具体分析,故实验模型血脂的改善是否为山楂黄酮的作用仍不明确。本研究拟通过山楂中黄酮类化合物对大鼠高脂模型进行干预,以检测山楂和山楂黄酮调节血脂的效果。 1 材料和方法 1.1 动物 健康雄性Sprague-Dawley大鼠80只,体重150～180 g,由北医大实验动物部提供。 1.2 医学科学模型 大鼠的基础饲料和高脂饲料均由中国医学科学院实验动物研究所提供。大鼠高脂饲料由1%胆固醇、10%猪油、10%蛋黄粉和79%基础饲料组成。 1.3 需浓度的混悬液 山楂黄酮 自河北兴隆山楂集团购得山楂总黄酮,加蒸馏水配成所需浓度的混悬液; 山楂汁 市售鲜山楂去核,加水煎2 h过滤并定容成相当于每毫升含0.2 g山楂的山楂汁,再用蒸馏水稀释成所需浓度(每升含山楂0.05 g和每升含山楂0.2 g)。 1.4 高脂饲料+黄酮山楂 大鼠分笼饲养,自由进食饮水,饲养环境温度18℃～22℃,自然光照。大鼠先用普通饲料适应性喂养1周,然后采血测定血清总胆固醇,按体重和血清胆固醇水平随机分为12个组,每组10只,各组处理如下。 10 mg黄酮组,高脂饲料+黄酮(黄酮10 mg/kg BW);40 mg黄酮组,高脂饲料+黄酮(黄酮40 mg/kg BW);80 mg黄酮组,高脂饲料+黄酮(黄酮80 mg/kg BW);250 mg黄酮组,高脂饲料+黄酮(黄酮250 mg/kg BW);0.5 g山楂汁组,高脂饲料+山楂汁(山楂0.5 g/kg BW);1.0 g山楂汁组,高脂饲料+山楂汁(山楂1.0 g/kg BW);正常对照组,基础饲料;高脂对照组,高脂饲料。 样品按1 mL/100g BW灌胃,实验期5周。实验期末,经股动脉采血,然后颈椎脱臼处死动物并摘取肝脏。 1.5 观察指标和方程式 1.5.1 hdl-c酶法检测l-c TC以CHOD-PAP酶法测定,TG以GPO-PAP酶法测定,HDL-C以HDL-C酶法测定,试剂盒由北京中生生物高技术公司提供。LDL-C用Friedewald公式计算(当甘油三酯浓度低于4.5 mmol/L时):LDL-C=TC-(HDL-C+TG/2.2)。 1.5.2 血清脂质测定方法 精确称取肝组织200 mg,加氯仿-甲醇(1+1)溶液2 mL匀浆,振荡抽提24 h,以氯仿-甲醇(1+1)溶液定容至2 mL,以2 000 r/min离心10 min,取上清液挥干,再加入2 mL氯仿-甲醇(1+1)溶液溶解,取10 μL按血清脂质测定方法测定。 1.6 统计分析 用SPSS统计软件包进行单因素方差分析,P0.05统计学有显著意义,实验结果以均数±标准差表示。 2 结果 2.1 降低血清下总胆固醇及血清黄酮水平 由表1可见,喂饲高脂饲料5周后,各实验组和高脂对照组血清总胆固醇和甘油三酯水平明显高于正常对照(P0.05),说明利用高脂饲料成功地建立了高脂血症模型。各实验组总胆固醇水平与高脂对照组相比差异无明显性,除10 mg黄酮组外其余各实验组血清甘油三酯水平明显低于高脂对照组(P0.05),说明山楂及山楂黄酮有良好的降低血清甘油三酯水平的作用。各组间HDL-C水平差异无明显性。除两个山楂汁组LDL-C浓度明显高于高脂对照组(P0.05)外,其余各实验组与高脂对照组相比无明显差异。 2.2 肝脏胆固醇含量 由表2可见,40 mg黄酮组、80 mg黄酮组、250 mg黄酮组和1.0 g山楂汁组肝脏胆固醇含量明显低于高脂对照组(P0.05),其余各实验组与高脂对照组相比差异无明显性。各实验组肝脏甘油三酯含量明显高于正常对照组而低于高脂对照组(P0.05)。 3 对大鼠血清tc的影响 动物血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、肝脏胆固醇和肝脏甘油三酯水平是反映机体脂质代谢的主要指标。本研究中发现山楂和山楂黄酮能明显降低高脂血症大鼠的血清TG水平、肝脏甘油三酯含量和肝脏胆固醇含量。Choi-JS的研究也提示一种天然黄酮