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饮用水生产过程中氯消毒的应用 0 生物过程在线监测 在线生物监控技术的基本原则是，当暴露于有毒物质或环境条件显著变化时，试验动物的行为生态变化是可以利用的。适用于水质监测的在线生物监测仪通常采用蚤、鱼、虾等小型敏感生物,将其运动行为转化成电信号,实现对水质改变的在线监测。其中采用的大型蚤(Daphnia magna)是一类小型枝角类动物,生活史较短,对生存环境内化学组成的变化非常敏感,是一种标准的水体质量监测生物,已经成为在世界范围内广泛应用的生物种类。在对大型蚤作为水体污染指示生物,化学品安全性评价的试验动物,甚至pH对其影响等方面已经做了大量工作[3～5]。 目前国内各给水厂常用液氯消毒,余氯可能会对进行在线监测的敏感生物(如大型蚤)的生长和行为产生影响。因此,本文根据出厂水中余氯的水平进行了大型蚤急性和慢性毒性测试,探讨了以大型蚤进行在线生物监测时可能存在的问题,为利用大型蚤作为在线生物监测技术中的试验动物,及其在饮用水生产安全保障体系建设中应用积累基础数据。 1 材料和方法 1.1 水、污、细生栅藻大型蚤的制备 本研究所采用的受试大型蚤由中国环境科学院提供,均为实验室培养三代以上的出生24 h左右的同龄幼蚤。培养温度22±2℃,光照强度3 000-4 000 lx,光照周期16L:8D。采用国际标准化组织规定的标准稀释水(Standard Reference Water,SRW),pH为7.8±0.2,硬度(以CaCO3计)为250±25mg/L,试验周期内喂食斜生栅藻(Senedesmus obliqnus)。 取多只体内有卵的大型蚤分别放于50 mL的烧杯内进行培养,直至产出幼蚤。将出生后24 h的同龄大型蚤取出放于同一个烧杯内,挑选健康的、无病菌的,没有受伤的幼蚤进行试验。 1.2 慢性毒性试验 采用48 h的暴露试验测定水中余氯对大型蚤存活率的影响,并采用40 d暴露试验确定余氯对大型蚤生长及生殖力的影响。 用不同浓度次氯酸钠配制不同余氯浓度的试验溶液。在24 h,48 h暴露试验中,采用SRW作对照,设定4组余氯浓度不同的试验组,分别为0.16mg/L,0.32 mg/L,0.48 mg/L,0.64 mg/L,0.80mg/L,暴露结束后以是否能够移动为指标确定水中大型蚤的存活率,如果在轻微的搅动以后,15 s内大型蚤不活动,则认为大型蚤死亡,试验过程中不给大型蚤投加任何食物。 慢性毒性试验以SRW作对照,根据48 h暴露试验得出的大型蚤的最小致死剂量(MLD)为暴露剂量,测定40 d后大型蚤的生长和生殖指标变化。在40 d暴露过程中,对照组每周换水3次,试验组每隔12 h换水一次。 上述试验中,每个试验容器中使用大型蚤的个数为30只。在急性毒性试验中每隔3 h观察一次,对死亡的大型蚤进行计数。在慢性毒性试验中每隔3 h观察一次,及时清理死亡的蚤及产下的幼蚤,记录暴露后第30-40 d内存活大型蚤的体长,产第一胎幼蚤时间,所产胎数和每胎产幼蚤数。 毒性数据采用SPSS 10.0版本的统计软件进行处理,显著性检验设定为p0.01。 2 结果与讨论 2.14 水体内余氯的浓度 不同浓度余氯对大型蚤存活率的影响见图1。结果表明,大型蚤在对照组中的存活率为100%,在余氯浓度为0.16 mg/L的水中24 h和48 h存活率均大于95%。因此0.16 mg/L可以作为余氯对大型蚤毒性的MLD值,所导致大型蚤死亡率在试验误差范围内。 随着水体内余氯浓度的增加,大型蚤的死亡率逐渐增加(见图1)。计算得到24 h和48 h的EC50值分别为0.43 mg/L和0.27 mg/L。 2.2 u3000对大型蚤的生殖力指标影响 当水中余氯为0.16 mg/L时,慢性毒性暴露中大型蚤的体长及生殖情况见表1。可以看出,经过40 d的暴露后,大型蚤无论是在生长还是在生殖方面均明显受到余氯的影响。 根据表1结果,对照组的大型蚤在40 d暴露后存活率为90%以上,没有超出生物毒性测试中对照组死亡率10%的规定,生长和生殖状况都明显好于暴露于0.16 mg/L余氯的试验组。 与对照组相比,暴露于含0.16 mg/L余氯水中的大型蚤40 d后的体长平均缩短1.18 mm,差异极显著(p0.01)。在生殖力指标中,从暴露开始到产下第一胎所用的时间从对照组的120 h增加到449 h,暴露期间所产幼蚤胎数从16胎降低到约4胎,40 d内所生产的幼蚤数量则从近百只降低到约6只,反映试验动物暴露期受到水中余氯的严重影响,对其生殖生理系统产生相当程度的损伤。 过去有关水中余氯对水生生物毒性的研究不多。但是从氯的强氧化性质,可以初步推测毒性作用的机理应该主要是氧化性损伤。 目前一般饮用水处理过程对水中游离余氯的规定是在与水接触30 min后不应低于