最新：人类卵母细胞与胚胎玻璃化冷冻中国专家共识（2023年）.pdfVIP

最新：人类卵母细胞与胚胎玻璃化冷冻中国专家共识 (2023 年） 摘要 人类卵母细胞和胚胎玻璃化冷冻是辅助生殖技术的重要组 成部分。 由中国医师协会生殖医学专业委员会发起，参考最 新国际指南和共识 ，结合中国临床实践现状，经充分讨论后 形成该共识， 旨在加强玻璃化冷冻技术质量控制，进 — 步改 善卵母细胞及胚胎冷冻结局，提升辅助生殖服务质量。 卵母 细胞和胚胎玻璃化 冷 冻 保 存是人类辅助生殖技术 ( assisted reproductive technology, ART) 的重要环节。 相较于 传统的程序化冷冻，玻璃化冷冻技术以其简单快速、 不依赖 昂贵设备，且复苏率极高的显著优点，在国内外各大生殖医 学中心迅速普及推广，从而为人类生育力保存、 胚胎植入前 遗传学检测以及全胚冷冻策略 的广泛临床应用 ，提供了必要 的核心技术支持。 卵母细胞及胚胎的冷冻复苏结局受诸多因 素影响，包括冷冻保护剂种类 、 样本平衡时间 、 降温／升温速 率和冷冻载体类型等， 造成各生殖中心间冷冻结局的差异。 有鉴千此，参考最新指南和共识 [1-7] ，结合中国临床实践，由 中国医师协会生殖医学专业委员会发起，组织本领域专家对 人类卵母细胞与胚胎玻璃化冷冻技术流程和细节进行归纳 总结，以期提供— 套全面系统的玻璃化冷冻操作规范指导意 见， 提升生殖医学中心服务质量。 一、 人员资质培训 初学者培训采用导师负责制，以经验丰富的胚胎学家作为指 导老师，由指导老师依据质控指标和经验判断初学者达到标 准后， 方可进入下一 阶段培训。 整个培训过程形成书面记录 存档。 1 、 理论学习 初学者应理解玻璃化冷冻的基本原理， 掌握冷冻保护剂浓 度 、 操作温度 、 降温／升温速率等基本概念及控制方法 (8] 。 2、 动物样本 建议初学者在指导老师监督下使用动物样本进行为期1~2 个月的培训。以小鼠8－细胞胚胎为样本不断练习冷冻和解冻 操作， 以熟练掌握试剂耗材的使用方法（8] 。 鉴千小鼠胚胎对 冷冻和解冻操作的敏感性低于人类胚胎(9] ， 建议对初学者的 要求设为操作 50 例小鼠 8 －细胞胚胎的复苏率不低千同中心 人类卵裂期胚胎（第 3 天）复苏率，且复苏后的小鼠 8 －细胞 胚胎需继续培养24~48 h, 其囊胚形成率应红80%(10]。 由千 鼠与人的种属差异，动物样本操作应在单独设置的培养室开 展， 不宜在人类体外受精(invitro fertilization , IVF)实 验室进 行。 3、 人类废弃卵母细胞或胚胎 使用常规废弃人类卵母细胞或胚胎进行培训，如不成熟卵母 细胞、 多精受精卵母细胞、 废弃的卵裂胚或囊胚（多精受精 卵母细胞来源），以熟悉人类卵母细胞或胚胎形态体积及冷 冻解冻操作。 4、 临床实践操 初学者通过使用动物样本和人类废弃样本熟练掌握技术，在 复苏率达到控制标准后，由指导老师带领初学者开展临床实 践操作， 分配患者的小部分卵母细胞／胚胎交由初学者处理， 建议初始比例不超过20% 。 二、 试剂与耗材的选择使用 1、 玻璃化冷冻保护剂 主要包括渗透性和非渗透性冷冻保护剂。 前者具有较好的水 溶性和膜渗透性。 高浓度渗透性冷冻保护剂所形成的高渗透 压环境可促使细胞快速脱水， 同时渗透性冷冻保护剂能迅速 进入细胞内并置换水分子，这既能避免降温过程中大冰晶的 形成，又能确保在极低温度下细胞内呈玻璃化状态，最终实 现在液氮中长久保存。 常用的渗透性冷冻保护剂有乙二醇、 丙二醇 、 丙三醇