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电泳技术在生化分离领域的运用 ABC 摘 要: 电泳技术，是指在电场作用下带电颗粒在由于所带的电荷不同以及分子大小差异 而有不同的迁移行为从而彼此分离开来的一种实验技术。在生化分离领域，主要运用的电泳 技术包括凝胶电泳，薄膜电泳，等电聚焦等。本文将着重介绍毛细管电泳和凝胶双向电泳的 运用。 关键词: 双向凝胶电泳，毛细管电泳，生化分离 Applications of Electrophoresis in the Field of Biochemistry Separation ABC (Department of Chemical and Biochemical Engineering, Xiamen Univeristy, Xiamen 361005, China) Abstract ： Electrophoresis is a method basically used for separating macromolecules, such as nucleic acids or proteins, in terms of molecular sizes, electric charges, and other physical properties under applied electrical field. This paper introduces the development of the electrophoresis technique, discusses some important methods including gel electrophoresis, film electroprssis, isoelectric focusing and so on. The applications of the two-dimensional electrophoresis and the capillary electrophoresis are analyzed in detail. Key words：Two-dimensional electrophoresis; capillary electrophoresis; biochemical separation 前 言 许多生物分子都带有电荷，但由于混合物中各种组分所带电荷性质、电荷数量以及相对 分子质量的不同，在同一电场的作用下，在一定时间内各组分移动的距离不同，从而达到分 离鉴定各组分的目的，这是电泳的基本原理。从19 世纪开始的电泳技术研究到现今电泳技 术在生化分离领域的广泛运用，先后出现了胶体电泳，滤纸电泳，凝胶电泳，和目前广受重 视的毛细管电泳等多种电泳技术。作为生化分离，分析的重要手段，电泳技术在稳定性，分 辨率和保持产物活性方面已取得了巨大的进步，当然还存在着电泳结果不能直接分析，必须 进行染色，而不同蛋白质与染料的结合差异较大，还不能广泛应用质谱技术、高敏感检测技 术直接分析双向凝胶电泳结果，实现分析自动化等问题。本文介绍了电泳技术的原理，发展 和现状，并着重分析了目前广泛运用和研究的毛细管电泳以及双向凝胶电泳，展望电泳技术 将不断发展，日渐完善。 1. 电泳技术的产生，发展与现状 1809 年俄国物理学家Ре й с е 首次发现电泳现象。他在湿粘土中插上带玻璃管的正 负两个电极，加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊，即带负电荷的粘土颗粒向正极 移动，这就是电泳现象。 1909 年Michaelis 首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。他用不同pH 的溶液在U 形管中测定了转化酶和过氧化氢酶的电泳移动和等电点。 1937 年瑞典Uppsala 大学的Tiselius 对电泳仪器作了改进，创造了Tiselius 电泳仪，建 立了研究蛋白质的移动界面电泳方法，并首次证明了血清是由白蛋白及α 、β 、γ 球蛋白组 成的，由于Tiselius 在电泳技术方面做出的开拓性贡献而获得了1948 年的诺贝尔化学奖。 1948 年Wieland 和Fischer 重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法，对氨基酸的分 离进行过研究。 从本世纪50 年代起，特别是1950 年Du