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二氢杨梅素的分离、鉴定及药理作用
二羟基杨树林素为3、5、7、3、4、5、6羟基二、3-二羟基黄酮醇(酰胺;my),又名双羟杨梅素和蛇葡萄素,是黄酮类化合物。该化合物首次由Kotake和Kubota于1940年从葡萄科植物蛇葡萄属植物福建茶即楝叶玉葡萄A.Meliaefolia的叶中分离得到,命名为蛇葡萄素。据报导,二氢杨梅素具有消炎、止咳、祛痰、镇痛、抑菌、抗高血压、消脂以及解乙醇中毒等药理作用。目前国内外对二氢杨梅素已有广泛的研究,本文就近年来国内外对二氢杨梅素的研究做一综述。
1 藤茶及藤茶种类
二氢杨梅素来源广泛,存在于葡萄科、杨梅科、杜鹃科、藤黄科、大戟科及柳科等植物中。资料显示二氢杨梅素大量存在于葡萄科蛇葡萄属植物中,如藤茶即显齿蛇葡萄(A.grossedentata)、粤蛇葡萄(A.cantoniesis)、羽叶蛇葡萄(A.chaffanjonii)、蛇葡萄(A.sinica)、东北蛇葡萄(A.brevipedunculata)、光叶蛇葡萄(A.sinciavar.hancei)等,其中藤茶尤为特别。广泛分布于我国的广东、广西、云南、湖南、湖北、江西等省区的显齿蛇葡萄植物的幼嫩茎叶中,发现其春夏幼嫩茎叶中二氢杨梅素的含量达到样品干重的20%以上,幼叶中的心叶可达40%以上。
2 乙酯溶液
二氢杨梅素为白色针状结晶,mp:245~246℃,易溶于热水、热乙醇,溶于甲醇、乙醇,微溶于水、乙酸乙酯,难溶于氯仿、石油醚。林淑英等的研究表明:二氢杨梅素在水相中随时间和温度的增加会变得不稳定,发生氧化且不可逆,p H值是影响二氢杨梅素稳定性的重要因素,酸性和中性条件(p H7.0)为二氢杨梅素应用和保存的适宜p H值条件,金属离子Al3+、Fe3+、Cu2+等对二氢杨梅素的稳定性有很大的影响。
3 为溶剂、成分配的二氢杨素
覃洁萍等研究广西藤茶中的黄酮类成分,从中分离出二氢杨梅素,含量为19.6%。郑成等[7~8]用微波萃取法研究藤茶中的二氢杨梅素的提取工艺,二氢杨梅素的提取率为25.11%;用乙醇辅助法提取藤茶中的二氢杨梅素,以水为溶剂,考察了乙醇预处理时间、茶叶与乙醇的料液比、加热时间等因素对提取率的影响,通过单因素分析和正交设计确定了最佳提取工艺条件,最佳提取工艺条件为:乙醇预处理时间15h,茶与乙醇的料液痹为1:8,加热时间为30min,在此条件下二氢杨梅素的提取率34.23%。杨铃等用微波萃取法从藤茶中提取二氢杨梅素,正交设计法以水为溶剂,考察了提取温度、微波辐射时间及料液比3个因素,每个因素3水平,选择L9(33)正交设计表。结果表明:在提取温度为95℃、微波辐射时间为15min、料液比为1:20时二氢杨梅素的提取率最高。何桂霞等用石油醚回流脱去藤茶中的脂溶性色素,脱脂后的药材用95%乙醇回流提取两次,得乙醇提取液,减压回收乙醇至无味,加适量水加热溶解,趁热过滤,滤液放冷后析出大量黄色沉淀,将沉淀物用水反复重结晶得白色针状晶体,经鉴定为二氢杨梅素。李卫等以水为提取溶剂用逆流法(图1)提取二氢杨梅素并分别研究了影响二氢杨梅素提取收率的几个因素。研究表明,温度越高越有利于二氢杨梅素的提取,用沸水提取收率最大,料液比为1:10时最有利于二氢杨梅素的自然沉淀。提取时间在60min以前,二氢杨梅素的收率随提取时间的延长而增加,而在60min以后,二氢杨梅素的收率随提取时间的延长而减少。用偏碱性的水进行提取比用中性水和酸性水要好。周天达等研究藤茶中双氢黄酮醇,分离出一个白色晶体,元素分析得分子式为C15H12O8[实验值(%):C56.22,H3.78,计算值(%):C56.25,H3.75]。MS m/e:320(M+),292(M+,CO),291(M+,-CHO)。HCL-Mg反应呈紫红色,UV nm(log E):291(4.18)。IR:3350(-OH),1650(宽峰,-CO-)。13CMR(20MHz,DMSO-d6):166.8,163.3,162.5,145.7,145.5,133.4,133.3,127.1,107.4,107.2,106.9,106.6,100.4,95.9,94.9,83.2,71.6。HNMR和D20交换波谱数据提示,该化合物具有6个氧氢(羟基)质子和6个碳氢质子。经波谱分析,该化合物为3,5,7,3′,4′,5′-六羟基2,3-二氢黄酮醇,即二氢杨梅素。
4 藤茶中总黄酮类成分的检测
覃洁萍等以双氢杨梅树皮素为指标,采用差视分光光度法测定广西瑶族腾茶中黄酮类成分的含量,利用藤茶样品溶液中的黄酮类成分与Zr OCl2络合,所测得的络合前后的吸光度差值与黄酮类成分在一定浓度范围内存线性,该方法操作简单、重现性好,可作为该药材的质量控制方法。何桂霞等[13~15]采用分光光度法对藤茶
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