顶空固相微萃取法测定哈密瓜汁中挥发性芳香成分.docxVIP

顶空固相微萃取法测定哈密瓜汁中挥发性芳香成分 哈密瓜（cucumismello.var.receive）的吸引香味是其产品类别的重要评价指标。哈密瓜属热敏性瓜果,在加热处理数分钟后其香气成分便损失殆尽,且产生令人不愉快的蒸煮味,完全失去了其原有的风味品质特征,因此哈密瓜热加工中的变味问题引起了风味研究者的关注,成为该领域研究热点和难点。 采用不同提香方法会产生不同的分析结果。1971年Kemp等在用减压蒸馏法提取的风味浓缩物中检出了大量的九碳醇类和醛类,只发现极微量的酯类和苯甲醛。1997年宛晓春等采用Amberlite XAD-2吸附新疆伽师瓜香气,得到1 3种成分,主要是醇、醛、酮,酯类仅有2种,认为3,6-壬二烯醇、6-壬烯醇、苯甲醇及呋喃类物质是哈密瓜风味的主体成分。2004年马永昆等采用固相微萃取方法对不同成熟度金皇后甜瓜汁的香气进行富集,得到45种成熟金皇后甜瓜的挥发成分,初步确定9种成分为金皇后甜瓜的特征香气。 S P M E方法应用于哈密瓜香气成分的研究相对较少,缺少SPME方法实验参数的系统研究。在马永昆研究工作基础上,结合HS-SPME-GC-MS技术对伽师瓜果汁香气成分的实验参数加以探讨、优化并对其可行性加以分析,确定出最佳萃取条件,并对哈密瓜果汁挥发性芳香物质进行了系统分析和鉴定,以期建立快速、稳定、高效的检测手段和技术,为今后建立不同品种哈密瓜香气的色谱图库、科学评价鉴定哈密瓜的香气品质以及哈密瓜变味机理的研究提供参考。 1 材料和方法 1.1 储备液的制备 伽师瓜[哈密瓜(Hami Melon)的一种]采自新疆吐鲁番地区,选取大小和果色一致的果实,取果肉榨汁,200目滤网过滤,-1 8℃冻藏。 庚醇、辛醛、壬醛、柠檬烯、丁酸乙酯、2-甲基丁酸乙酯、乙酸己酯、己酸丁酯(标准品,色谱纯)上海爱普香料有限公司;乙酸乙酯(色谱纯,纯度大于99.5%);以上标准品均用甲醇(色谱纯)分别配成一定浓度的储备液备用;氯化钠(分析纯)。 1.2 gc/ms分析仪 手动SPME进样器美国Supelco公司;HP5973气相色谱-质谱联用仪美国Agilent公司;SP-3400气相色谱北京分析仪器厂;榨汁机上海灿坤电器公司。 1.3 方法 1.3.1 固相微萃取器 SPME顶空萃取:选取大小和果色一致的果实3个(约9kg),去皮榨汁并过滤待用。取果汁8m L放入15m L样品萃取瓶中,加入2.4 g氯化钠,使其质量浓度为0.3g/m L,内标及磁力转子置于固相微萃取工作台上预热10min;将固相微萃取器的聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯/碳分子筛(Polydi meth ylsi loxa ne/Divinylbe nzen e/Carboxen,PDMS/DVB/CAR)萃取头通过瓶盖聚四氟乙烯隔垫插入样品萃取瓶的顶空,推出吸附头使其暴露于萃取瓶顶空蒸汽中进行萃取。当样品萃取平衡后,缩回纤维头,迅速将针管插入气相色谱仪的进样口,推出纤维头热解析3min,同时启动气相色谱仪采集数据。 1.3.2 进样器2min 色谱柱:HP-5毛细管柱(25m×0.2mm,0.11μm);升温程序:40℃保持2min,以4℃/min升至75℃,以1℃/m in升至80℃,以10℃/mi n升温至23 0℃,保持3min;载气(N2)流速1.0m L/min。进样器温度250℃;检测器温度25 0℃,无分流进样。以色谱峰保留时间定性,以内标法定量计算。 1.3.3 质量分析条件 电子轰击(EI)离子源;电子能量70e V;传输线温度250℃;质量扫描范围m/z 15~500。 1.3.4 萃取工艺条件的优化 定性:利用GC-MS进行定性,通过计算机检索与N I S T 0 2质谱库提供的标准质谱图对照,并参照文献、进行确认。 定量:数据处理采用BF2002色谱工作站软件。选择庚醇为内标,使其在哈密瓜果汁中的质量浓度为20.4ng/m L,以哈密瓜果汁中代表性的香气物质测定它们对庚醇的响应因子。哈密瓜果汁中鉴定出的醇类、酯类和醛类物质的质量浓度以相应的真实物质或结构相近的物质的相对响应因子计算。 根据方法的设计原理,SPM E加热温度、萃取时间、盐添加量被认为是影响目标化合物在萃取膜上的萃取效率的主要因素。本实验对上述条件进行三因素三水平的正交试验,以峰面积为判定指标进行直观分析;在此优化条件基础上,进行方法线性范围、回收率、检出限等实验。每个处理进行3次平行实验,测定结果取其平均值。 2 结果与分析 2.1 哈密瓜果汁的萃取条件研究 2.1.1 单因素spme萃取效果测试 2.1.1. 饱和电解质nacl溶液对萃取液的影响 本实验对添加电解质——饱和Na Cl溶液(2.4g Na Cl,即0.3g/m L)、半饱和Na Cl溶液(1.2g N