多角体融合的家蚕表皮膜蛋白N141的高效表达与纯化的中期报告.docxVIP

多角体融合的家蚕表皮膜蛋白N141的高效表达与纯化的中期报告 家蚕表皮膜蛋白N141（BmEP143，Bombyx mori eggshell protein 143）是一种含有重复结构的多角体蛋白，主要在家蚕卵壳内部结构中起着支撑作用。由于家蚕的卵壳作为一种天然的纳米多孔材料，因此有着广泛的应用前景。然而，由于家蚕表皮膜蛋白N141的结构复杂性和高分子量，其高效表达和纯化一直是一个难题。 在本项目中，我们采用大肠杆菌作为表达宿主，利用融合标签的策略，成功地高效表达了家蚕表皮膜蛋白N141。具体而言，我们将N141基因的序列延长，融合到了一个GST标签上，使其易于纯化。我们使用较低的诱导浓度和恒温条件来促进表达，同时利用爆破细胞法进行裂解，最终得到了高表达的可溶性GST-N141融合蛋白。 随后，我们采用GST亲和层析和凝胶过滤层析结合的纯化策略，成功地纯化了GST-N141。我们发现，在选择纯化条件时，选择合适的洗脱缓冲液和适当的pH值对于纯化效果至关重要。最终，我们得到了纯度较高的N141蛋白样品，可以用于后续的结构研究和应用探索。 总体而言，我们成功地高效表达和纯化了家蚕表皮膜蛋白N141，并且获得了高品质的样品。我们将继续进行进一步的结构和功能研究，以便更好地理解家蚕卵壳的内部结构和性能，并且探索其在生物医学和环境领域的潜在应用。