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生化分析常见交叉污染探讨与对策Ppt;一 如何理解交叉污染 ;引发交叉污染的原因;丙氨酸氨基转移酶 (ALT)(IFCC法)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)(IFCC法)试剂中含有高活性的LD;
例2:选择高浓度的Cl 样本浓度值为140 mmol/L,低浓度Cl 样本第一次检测结果为86 mmol/L,第三次检测结果为80 mmol/L。
因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染。
TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C最终反应都是过氧化氢和4-氨基安替比林在过氧化酶的作用下产生醌亚胺显色(505nm),因此这些项目间会相互干扰。
携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值
判定有污染
试剂成分参与反 应:上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而干扰下一反应的测定结果。
由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果, 可能有偶然因素,还必须进行确认实验。
因为试剂针携带进来的上一个测试的干扰物会和下一个试剂发生反应,由于携带量小,一般在试剂空白段(2min)即反应平衡。
DBil(钒酸盐氧化法)试剂中含有表面活性剂的酒石酸盐缓冲液会影响ALT活性,对测定结果有负干扰。
由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果, 可能有偶然因素,还必须进行确认实验。;三 不同类型交叉污染的鉴别 方法及原因 ;通过计算携带污染率q = (86 – 80)/ 60 * 100% = 10%。
污染
5之间,ALP、γ-GT、LDH则在碱性条件下最适宜;
直接胆红素(DBil)(重氮法)试剂含有EDTA,Mg 2+试剂中含有 EDTA,均能与Ca结合,从而影响Ca的测定;
比较第一个B项目检测结果同第三个B项目检测结果,如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近,可以判断 A项目对B项目有携带污染。
葡萄糖(GLU)(氧化酶法)、总蛋白 (TP)与酸性磷酸酶(ACP)试剂中含有较高浓度的钾(K + );
且不同仪器的动作原理不完全相同,设计一个较为简单,合理的实验方法是需要重点考虑的 内容。
生化仪状态不良,使用不当
以(A→B)为例,(D→E)的情况相同
CHOL、TG试剂及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂中含有胆酸钠;
(4)影响反应条件:如上一试剂缓冲液成分改变了下一反应的pH环境,从而改变反应??率,如 TP(双缩脲法)测定需在pH8~9时,蛋白肽键才都能与碱性铜溶液作用生成紫色反应,若pH<8时,则会导致TP结果偏低,还直接影响球蛋白、白蛋白/ 球蛋白的结果;
5之间,ALP、γ-GT、LDH则在碱性条件下最适宜;
生化分析仪的比色杯大体分为两种,一 种是循环使用的(如石英比色杯等),另一种是需要定期更换的(如塑料比色杯等),每个比色杯检测完毕后,进行清洗,然后继续下一个检测项目的检测。
CHOL、TG试剂及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂中含有胆酸钠;
由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果, 可能有偶然因素,还必须进行确认实验。;测试顺序:3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L
(注上述顺序前的数字代表测试数量,如3L代表连续测试3个低值样本)
定义:L – L 值为紧跟在低值标本后低值标本的结果。
H – L 值为紧跟在高值标本后低值样本的结果
携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值
判断标准:
当携带污染指标小于 3SD
SD是 ( L – L ) 结果的SD值。;试剂针携带污染;TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C最终反应都是过氧化氢和4-氨基安替比林在过氧化酶的作用下产生醌亚胺显色(505nm),因此这些项目间会相互干扰。
不同类型的交叉污染的发生几率由高到低排列:
携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值
全自动生化分析仪一般采用双试剂针,即所有项目的一试剂都共用试剂针R1,所有项目的二试剂都共用试剂针R2。
对同一份血清标本重复测定GGT 或ALT或 AST20次以上,结果重复性较差且有走高趋势。
根据经验,比色杯的污染对结果影响最大,因为比色杯最难以清洗干净,且在实际工作中难以判断该比色杯上一测试的项目。
样本针携带污染率试验(二)
如:Mg 2+测定试剂的络合 剂亦能与铁(Fe)结合,影响铁与铁络合剂的结合;
试剂成分参与反 应:上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而干扰下一反应的测定结果。
丙氨酸氨基转移酶 (ALT)(IFCC法)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)(IFCC法)试剂中含有高活性的LD;
葡萄糖(GLU)(氧化酶法)、总蛋白 (TP)与酸性磷酸酶(ACP)试剂中含有较高浓度的钾(K + );
样本针携带污染率试验
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