北科大微生物培养基的配制及灭菌优质文档.pptVIP

北科大微生物培养基的配制及灭菌;肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基，属于天然培养基（complex media, undefined media）。其主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。它们分别提供微生物生长繁殖所需要的碳源、氮源、能源、生长因子和无机盐等。 配天然培养基时可以用自来水，但自来水中常含Ca2＋，Mg2＋离子，可与其他成分形成沉淀。;高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基(defined media) 。培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源，KNO3作为氮源，K2HPO4、MgSO4和FeSO4作为无机盐（高价阳离子盐需单独灭菌后临用前与含磷酸盐的培养基混匀）。 合成培养基必须用蒸馏水;豆芽汁葡萄糖培养基是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基，为半合成培养基(semi-defined media) 。培养基配方出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。;马丁培养基是选择培养基，属于半合成培养基，常用于从自然环境中分离真菌，其中的孟加拉红能抑制细菌和放线菌的生长，而对于真菌的生长则没有影响， 另外，在使用前，向培养基中加入去氧胆酸钠和链霉素(30u/ml)。去氧胆酸钠为表面活性剂，防止霉菌菌丝蔓延，还可抑制G+ 细菌生长；链霉素对多数G－ 细菌具抑制生长作用。从而达到分离真菌的目的。;产葡萄糖氧化酶菌株的筛选培养基;培养基——葡萄糖氧化酶;产葡萄糖氧化酶的微生物大多为霉菌。加入脱氧胆酸钠是为了抑制菌丝的形成以获得不互相粘连的霉菌菌落。加入硫酸链霉素是为了抑制细菌的生长。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖会生成葡萄糖酸，pH下降，可以通过CaCO3控制培养基的pH，并形成透明圈。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖会生成过氧化氢，可以氧化KI生成I，使淀粉变色，从菌落周围是否出现特异的淀粉蓝色圈可以判断出该菌是否产酶。;培养方法——葡萄糖氧化酶;实验材料;（6）高压蒸汽灭菌121℃灭菌20min。 5，可溶性淀粉10，KI 1. 其它：酒精灯、试管、称量纸、牛角匙、烧杯、量筒、玻棒、pH试纸、玻璃珠、三角瓶、封口膜、无棉塞的空试管、培养皿、各种包装纸、防水纸、绳索、棉花、记号笔、标签等。 每2人准备：带棉塞空试管5个、培养皿10-12个、相应的固体培???基100ml 平板筛选培养：采用Fiedure. 产葡萄糖氧化酶的微生物大多为霉菌。 （6）高压蒸汽灭菌121℃灭菌20min。 （4）将溶液倒入量筒中，补充水量至所需体积。 药品：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、马铃薯、蔗糖、KNO3、K2HPO4、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、可溶性淀粉、葡萄糖， (NH4)2HPO4、KH2PO4、 CaCO3 、KI、脱氧胆酸钠、硫酸链霉素、(NH4)2SO4、K2HPO4、KCl、琼脂等各种培养基的组成成分、0. 压力表的指针上升时，锅内温度也逐渐升高，当压力表指针升至15磅（0. 配天然培养基时可以用自来水，但自来水中常含Ca2＋，Mg2＋离子，可与其他成分形成沉淀。 土壤霉菌分离：取土壤样品5g，加入95mL的无菌水中，200r·min-1摇床振荡 1h。 抗生素等不耐热物质需要进行过滤除菌。 实验内容 （玻璃器皿的洗涤和包装） 葡萄糖80，蛋白胨3，(NH4)2HPO4 0. 肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基，属于天然培养基（complex media, undefined media）。 抗生素等不耐热物质需要进行过滤除菌。;过滤除菌 抗生素等不耐热物质需要进行过滤除菌。 滤器和容器等一般需要进行高温灭菌。;实验内容 （液体及固体培养基的配制过程）;如果培养基中某种药品用量太少，可以将其配制成较浓的溶液，然后按比例吸取一定体积溶液，加入至培养基中。 固体培养基的配制：可以在配制好的液体培养基中加入适量的琼脂粉，灭菌。未冷却前取出，摇匀。;肉膏蛋白胨培养基的配制;高氏合成一号培养基的配制;豆芽汁葡萄糖培养基的配制;马丁培养基的配制;实验内容 （棉塞的制作及试管、锥形瓶的包扎）;培养基配方出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。 北科大微生物培养基的配制及灭菌 2％去氧胆酸钠溶液 2ml（预先灭菌，临用前加入）链霉素溶液（10,000 u/ml） 0. 19， MgSO4·7H2O 0. 培养基配方出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。 1-2组制备细菌培养基（肉膏蛋白胨培养基）； 05g，MgSO4·7H2O 0. ——固体培养基配制完成！ 葡萄糖80，蛋白胨3，(NH4)2HPO4 0. 另外，在使用前，向培养基中加入去氧胆酸钠和链霉素(30u/ml)。 产葡萄糖氧化酶的微生物大多为霉菌。 产葡萄糖氧化酶的微生物大多为霉菌。 05g，MgSO4·7