高三生物一轮复习课件基因工程和蛋白质工程的应用.pptxVIP

;1. 提取原理： 原理①：DNA不溶于酒精溶液，但某些蛋白质溶于酒精溶液 原理②：DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度不同 2. 鉴定原理： 沸水条件DNA遇二苯胺显蓝色 ;3. 取材：鸡血，洋葱和猪血哪种好？ 洋葱需研磨促使破碎； 鸡血可以，吸水涨破并加入柠檬酸钠取血细胞； 猪血红细胞无核所以不选用。 ;4. 获取DNA滤液： 漏斗 + 纱布过滤，低温放置一段时间取上清液 或者直接离心后取上清 5. 获得DNA的粗提取物 滤液中加入体积分数为95%的冷却酒精静置 —— 白色丝状物就是DNA粗提取物;6. 鉴定 将丝状物或者沉淀物溶解在2mol/LNaCl溶液中， 加入二苯胺试剂，同时设置对照组观察： 实验组溶液显蓝色，对照组溶液无色;[典例] 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. 实验用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制剂 B. 洋葱研磨液需用滤纸过滤，以保证提取的DNA量 C. 将二苯胺试剂加入溶有丝状物的NaCl溶液电，沸水浴呈蓝色 D. 若提取的丝状物为黄色，说明其可能含有蛋白质等杂质成分;考点2 DNA片段的电泳鉴定;2. 重要步骤： 将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合， 再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。 留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物;3. 结果分析与评价 ① 成功扩增出DNA片段的判断的依据是什么？ 可以在紫外灯下直接观察到DNA条带的分布及粗细程度来评价扩增的结果。进行电泳鉴定的结果应该是一条条带。 ② 如果不止一条条带，请分析产生这个结果的可能原因。 漏加了PCR的反应成分， 各反应成分的用量不当， PCR程序设置不当等。 引物设计不合理， 退火温度过低； DNA聚合酶的质量不好等。 ;;2） 目的基因用BamHI和BglⅡ剪切，质粒用BamHI剪切，剪切后的目的基因和质粒能连接在一起，原因是_________________________________________。酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式，可用 ____________________酶对两种重组质粒进行剪切，通过凝胶电泳分析产物大小进行区分，如图2所示，图中 (填“样品1”或“样品2”)为所需基因表达载体。 ;;4） 易错题： 步骤③将农杆菌与甘蓝愈伤组织共培养后??在步骤④的培养基中添加__________以便筛选岀含目的基因的甘蓝植株。;1. 农牧业方面的应用;蛋白质编;工程菌;3. 医药卫生领域的应用; ;[生物反应器题型] 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。 (1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。 (2)在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用___________________________酶。进行基因转移时，通常要将外源基因转入__________中，原因是_______ 。 (3)通常采用_______________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 (4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的_____________细胞中特异表达。 (5)为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的___________________________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为________________。;比较内容;比较内容;4. 基因治疗 —— 必修二P95小字部分 是指用 取代或修补患者细胞中 的基因。;[经典例题] 番茄红素具有一定的抗癌效果。普通番茄合成的番茄红素易在番茄红素环化酶的催化作用下转化。科学家利用基因工程设计的重组DNA（质粒三）能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞可识别双链RNA并将该双链RNA和具有相同序列的单链RNA一起降解，从而阻止番茄红素的转化，提高番茄红素的产量。下图为利用质粒一和目的基因构建重组质粒三的过程示意图。请回答下列问题：;1）该基因工程中，“目的基因”是____________________基因，要想对该目的基因进行体外扩增，可从番茄组织中提取mRNA，通过逆转录获得____________用于PCR扩增。PCR扩增目的基因，需要设计相应的引物，设计引物时要避免引物之间出现_____________________。;2）PCR扩增时，DNA先在高温下_______键断裂，双链解链，然后在温度缓慢下降的过程中，引物与解开的链结合，这个过程叫做退火。退火温度的设定与引