河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(1003) .pdfVIP

河南农业大学考研专业课《现代分子生物 学》 课程试卷（含答案） __________学年第___学期 考试类型：（闭卷）考试 考试时间 ： 90 分钟 年级专业_____________ 学号_____________ 姓名_____________ 1、分析题（5 分，每题 5 分） 1. 写出从组织中抽取 RNA 的关键步骤，并解释如何判断RNA 质量。 答案： （1 ）从组织中提取RNA 的步骤如下： ①将组织在液氮中磨碎，每 50 ～100mg 组织加入 1ml TRIzol 裂解液溶解样品，充分吹打混匀。 ②每 1ml TRIzol 加入 2.0ml 氯仿，剧烈震荡 15s ，室温放置 5min。 ③4℃，10000g 离心 15min ，此时RNA 主要集中在水相中。 ④将水相转移至新的离心管中，加入等体积异丙醇，室温放置 10min。 ⑤4℃，10000g 离心 10min ，此时棕色可在离心管底部观察到 白色沉淀，即为 RNA。 ⑥用 75 冷的乙醇洗涤沉淀，4℃，7500g 以下，离心 5min ，弃 上清。 ⑦超净台中吹干，加入无 RNase 的水溶解。 （2 ）检测RNA 质量的方法如下： ①凝胶成像：取适量 RNA 溶液加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖凝胶 电泳，如果 28S 和 18S 条带明亮、清晰，并且 28S 的亮度在 18S 条 带的两倍以上，则认为 RNA 的质量是好的。 ②吸光度检测：使用紫外分光光度计检测 RNA 样品在 260nm、 280nm 处的吸光度，若两者的比值在 1.8 ～2.0 时，可认为 RNA 纯 度良好，蛋白质等其他物质的污染可以接受。 解析： 2、判断题（55 分，每题 5 分） 1. DNA 修复系统的作用是保证 DNA 序列不发生任何变化。（ ） 答案：错误 解析：DNA 修复系统的积极作用是修复已经出现发生的 DNA 损伤， 但是不能保证 DNA 序列不发生任何变化。 2. 一染色体 DNA 经内切酶 SalⅠ切割后，产生了若干个具有黏性末 端的 DNA 片段，将这些片段分别在 T4 DNA 连接酶的作用下自身连接成 环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。（ ） 答案：错误 解析：在 T4 DNA 连接酶的作用下，若干个具有黏性末端的 DNA 片 段自身连接成环，导入受体细胞后，并不是都可以进行中立独立的复 制。 3. 碱基的替换有两类即转换（transition）和颠换 （transversion），A 被 T 替换是转换，而 C 被 G 替换则是颠换。 （ ） 答案：错误 解析：碱基的替换有两类即转换（transition ）和颠换 （transversion ），同类碱基替换是转换，而嘌呤被半乳糖替换则是颠 换。 4. P53 蛋白参与监控细胞核 DNA 的损伤，因此是一个肿瘤抑制因子。 （ ） 答案：正确 解析：P53 是人体非常重要的抑癌基因，参与监控细胞核 DNA 的损伤， 它可以通过抑制细胞周期的进展，抑制细胞增殖。但是它的缺损会导 致细胞增殖失控（无限增殖）。 5. 增强子和沉默子是具有位置和方向效应的 DNA 元件。（ ） 答案：错误 解析：增强子和沉默子是不具有位置和方向效应的 DNA 元件。 6. STR 遗传标记属于一种微卫星 DNA 序列。（ ） 答案：正确 解析：微卫星 DNA 是重复单位序列最短，只有 2 ～6bp ，串联成簇， 长度 50 ～100bp ，又称为短联结重复序列（STR ）。 7. SDSPAGE 时，不同大小蛋白质分子的电荷质量比值趋近于相同。 （ ） 答案：正确 解析： 8. 单链 DNA 结合蛋白与 DNA 结合使其解链。（