培养基质量控制规程.docVIP

第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 7 页 培养基质量控制规程 1.目的 规范本中心微生物实验室培养基的内部质量控制工作。 2.范围 适用于实验室微生物培养基使用前的质量验收、使用过程中的质量控制。 3.职责 3.1 检验人员：按照本规程规对培养基使用前及使用过程中进行质量控制，确保培养基符合相关标准的要求。 3.2 科室负责人：负责指导、监督检验人员对培养基进行质量控制。 4.程序 4.1培养基采购 微生物科制订采购计划，经批准后选定合格的供应商，培养基的采购执行《服务和供应品的采购程序》 4.2培养基接收 4.2.1生产企业提供的材料 培养基生产厂家随产品应提供下列文件（电子版也可）： 培养基、独立成分、添加成分名称；产品编号；最终pH；储藏信息和有效期；标准要求及质控报告；必要的安全和（或）危害数据（SDS）。 4.2.2 验收 实验室接收到培养基之后应检查培养基的名称和批号、接收日期、有效期、包装的完整性，填写《培养基实验室验收记录表》。 4.3 贮存 4.3.1 概述 应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行培养基的保存和使用。 4.3.2脱水合成培养基及其添加成分的质量管理和质量控制 新购培养基及添加成分保存在密闭容器中，培养基的购买应有计划，掌握先购先用原则，实验室应保存有效的培养基目录清单，包括以下内容：容器密闭性复查、首次开封日期、内容物的感官检查，记录《培养基目录清单》。对于新开封的脱水培养基，应对其质量进行检查。通过粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化判断脱水培养基的质量变化。若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变不应再使用。 4.3.3 商品化即用型培养基 应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行保存和使用。 4.3.4 实验室自制的培养基 在保证其成分不会改变条件下保存，即避光、干燥保存。必要时在5℃+3℃冰箱中保存，通常建议平板不超过2周-4周，瓶装和试管装培养基不超过3个月-6个月，除非某些标准或者实验结果表明保质期比上述的更长。 不稳定的选择性物质和其他添加成分应即配即用，对发生化学反应或含有不稳定成分的固体培养基也应即配即用，不可二次融化。 观察培养基颜色变化，是否有蒸发/脱水情况，是否有微生物生长。当培养基发生这类变化时应禁止使用。 使用和进一步加热前，应事先将培养基平衡至室温。 4.4 培养基的实验室制备 4.4.1 概述 使用脱水培养基和其他含有有害物质（如胆盐或其他选择剂）的成分时，应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。使用脱水商品化合成培养基制备培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配置。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等。并形成完整的培养基配制记录，填写《商品化脱水合成培养基制备记录》。 4.4.2 配制用水执行GB4789.28，并定期填写《微生物实验用水记录表》。 4.4.3 称量和复水 称量所需量的脱水培养基，必要时佩戴口罩或通风橱中操作，先加入少量水，充分混合，再加水至所需的量。 4.4.4 溶解和分装 脱水培养基加水后适当加热，搅拌溶解，含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用个别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量水中，并充分溶解然后再加水至所需的量。 4.4.5 pH的测定和调整 用pH计测pH必要时调整，除特殊说明培养基灭菌后冷却到25℃时pH变化不应超过0.2个单位。 4.4.6 分装 将配置好的培养基分装到适当的容器中，容器的体积应比培养基体积最少大20%。 4.4.7 灭菌 4.4.7.1 培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。某些特定的培养基中含有对光和热敏感的物质，只能煮沸灭菌，煮沸后迅速冷却，避光保存；有些试剂则不需灭菌，可直接使用（参见相关标准或供应商使用说明）。所用灭菌设备应周期性的对灭菌效果进行性能测试并予以评价，对测试的结果应形成记录。填写《灭菌效果检测记录（湿热）》。 4.4.7.2 湿热灭菌 湿热灭菌在高压锅或制备培养基的容器中进行，高压灭菌一般采用121℃±3℃灭菌15min，具体培养基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。当培养基体积超过1000mL时，要对灭菌条件进行适当的调整，但应当按照标准或使用说明的规定进行。 注：大容量（1000mL）的培养基灭菌时可能会造成过度加热。 灭菌效果的控制是关键。加热后采用适当的方法冷却，以防加热过度。这对肠道菌培养基和大容器中的培养基等的灭菌十分重要。 4.4.7.3 过滤灭菌 过滤灭菌可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2μm的无菌设备和滤膜。过滤前先将滤膜和滤垫灭菌。过滤器于121℃灭菌15min（可以整体灭菌也可以拆卸后灭菌），灭菌后在无菌条件下进行组装。 注：一些滤膜上附