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中药复方及联合抗生素对常见致病菌体外抑菌活性的研究 随着抗生素的发明和应用，感染疾病比以前得到了更好的控制，但大量使用不合理的抗生素和药物也导致了抗感染药物的出现，给临床抗感染治疗带来了很大困难。中医在处理感染疾病方面发挥着优势，这证明了它具有一定的疗效。现代临床感染性疾病归于风温热病, 临床治疗采用清热解毒法, 亦有人认为适当加用补益类中药使得疗效更佳。有临床研究清热解毒制剂痰热清在治疗肺部感染性疾病方面有确定疗效, 靳颖华等通过Meta分析初步证实了其在治疗肺炎方面的有效性。魏云等发现对于小儿病毒性肺炎, 喜炎平退热等方面效果优于利巴韦林。梁朝矿发现抗生素联合热毒宁的抗感染效果优于单独使用抗生素。有研究甘草主要成分甘草酸苷可以通过调节TNF-A及IL-12的表达而发挥其对巨噬细胞的免疫调节活性。 现将3种清热解毒复方中药制剂以及复方甘草酸酐单独使用及联合抗生素使用后对常见致病菌的体外抑菌活性进行了研究, 现总结如下。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 药品、注射液、国药 (1) 药物:①痰热清注射液:10 m L/支, 批号:1210216, 国药准字: 上海凯宝药业股份有限公司。②热毒宁注射液:10 m L/支, 批号:121137, 国药准字: 江苏康缘药业股份有限公司。③喜炎平注射液:2 m L/支:50 mg, 批号 国药准字: 江西青峰药业股份有限公司。④注射用复方甘草酸苷, 每瓶含甘草酸苷40 mg, 盐酸半胱氨酸20 mg, 甘氨酸0.4 g, 批号:1208024A4, 国药准字: 哈尔滨三联药业有限公司。⑤盐酸左氧氟沙星注射液:2 m L∶0.1 g, 批号 国药准字: 扬子江药业集团有限公司。 (2) 菌株:标准菌株ATCC 25922大肠埃希菌、ATCC 29213金黄色葡萄球菌, 均购自天津市临检中心, 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为我院临床痰标本所分离。 1.1.2 细菌鉴定及药敏试验仪器 Biobase生物安全柜, 型号:BSC-1500II B2-X, 厂家:济南鑫贝西生物技术有限公司;LRH-MS霉菌培养箱, 型号:LRH-MS, 厂家:韶关市泰宏医疗器械有限公司;VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定及药敏仪, 型号:VITEK-2 Compact, 厂家:法国生物梅里埃公司;Densi CHEK Plus比浊仪, 厂家:法国生物梅里埃公司;营养肉汤:按照使用说明进行配制, 厂家:北京陆桥生物有限公司;血琼脂培养基:规格:90 mm, 批号:1001814700, 梅里埃 (上海) 生物制品有限公司。 1.2 方法 1.2.1 菌株鉴定及药敏分析 按照《全国临床检验操作规程》第三版要求进行痰标本的处理, 以平板划线法于血琼脂培养基做分离, 35℃培养18~24 h后观察菌落形态。用接种环挑取由临床分离的β-溶血的可疑菌落, 分纯接种于血琼脂培养基, 35℃培养18~24 h后, 用纯化的菌落, 在全自动微生物鉴定和药敏分析系统 (VITEK-2 Compact) 上鉴定并进行药敏实验, 药敏实验显示为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) 。MRSA的确认根据美国临床实验室标准研究所 (CLSI) 的标准, 用苯唑西林代替甲氧西林测定它对金黄色葡萄球菌临床分离株的最低抑菌浓度 (MIC) , 若苯唑西林对金黄色葡萄球菌的MIC≥4μg/m L, 定为MRSA菌株。 1.2.2 左、阴性对照 采用肉汤二倍稀释法, 研究3种复方清热解毒中药及复方甘草酸苷单独使用及与左氧氟沙星联合使用后对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌活性, 同时设立生长对照组及空白对照组。来观察不同复方中药对不同细菌的抑菌活性。 (1) 操作步骤:菌悬液的配制:用无菌棉签挑取经分纯实验菌菌落2~3个, 调节菌悬液浓度至0.5麦氏比浊管浓度, 使含菌量达1×108CFU/m L做实验菌悬液。 单独配药组:①盐酸左氧氟沙星组 (ZK) :盐酸左氧氟沙星注射液:规格:2 m L∶0.1 g, 取盐酸左氧氟沙星注射液20μL, 加入1980μL营养肉汤作100倍稀释, 然后再取上述稀释后溶液200μL加入1800μL营养肉汤内, 此时为1000倍稀释, 最终浓度为50μg/m L。 阴性对照组:取无菌试管加入500μL M-H肉汤, 不加实验药物, 只加菌液, 作为生长对照管, 即阴性对照管, 置35℃温箱中培养24 h, 肉眼观察。 将左克组1~10号无菌试管中加入500μL M-H肉汤。本组1号试管只加左克不加菌液作为空白对照管, 用于观察测试药物是