与雌激素受体2mRNA3’端非翻译区特异性结合蛋白的功能研究的中期报告.docxVIP

与雌激素受体2mRNA3’端非翻译区特异性结合蛋白的功能研究的中期报告 这是一份与雌激素受体2 mRNA 3’端非翻译区（3’UTR）特异性结合蛋白的功能研究中期报告。 研究目的： 本研究旨在探究雌激素受体2（ERα）mRNA 3’UTR特异性结合蛋白的生物功能以及通过3’UTR调控ERα mRNA稳定性的分子机制。 研究方法： 1. 克隆ERα mRNA 3’UTR序列并构建Luciferase报告基因载体，通过激素诱导建立稳定转染细胞系。 2. 利用RNA pull-down技术寻找能够与ERα mRNA 3’UTR结合的蛋白质。 3. 利用质谱鉴定鉴定和生物信息学分析鉴定标识得到的结合蛋白，在表达上调控或下调控后检测ERα mRNA 3’UTR稳定性的变化。 4. 生物信息学分析预测候选结合部位，进一步验证与ERα mRNA结合的3’UTR特异性结合蛋白和相应的结合底物间的作用机制。 研究成果： 1. 克隆了ERα mRNA 3’UTR序列并构建了相应的Luciferase报告基因载体，建立了经过激素诱导的稳定转染细胞系。 2. RNA pull-down分析表明，蛋白质A和蛋白质B能够与ERα mRNA 3’UTR结合。 3. 利用质谱鉴定和生物信息学分析鉴定标识得到蛋白质A和蛋白质B，并进一步发现它们能够调控ERα mRNA的稳定性，但具体作用机制尚待进一步研究。 4.