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《生物产品的分析与检验技术》 酶制剂的分析与检验—— 吸光光度法测定耐高温α-淀粉酶活力 主讲教师：左莹 α-淀粉酶根据最适催化温度分为中温α-淀粉酶和耐高温α-淀粉酶，其测定活力的温度分别为60℃和70℃。 这节课以耐高温α-淀粉酶中酶活力的测定为例介绍分光光度法测定α-淀粉酶活力的方法。 吸光光度法测定耐高温α-淀粉酶活力 （一） 原理 α-淀粉酶能将淀粉分子链中的α-1，4葡萄糖苷键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖，而使淀粉对碘呈蓝紫色的特异性反应逐渐消失，呈红棕色，其颜色消失的速度与酶活性有关，故可通过固定反应后溶液的吸光度计算其酶活力。 吸光光度法测定耐高温α-淀粉酶活力 （二） 试剂与仪器 1.试剂 商品α-淀粉酶、碘、碘化钾、磷酸氢二钠、柠檬酸、可溶性淀粉等 2.仪器 可见分光光度、pH计、移液管、容量瓶、试剂瓶、试管、恒温水浴锅、秒表等 吸光光度法测定耐高温α-淀粉酶活力 （三）操作流程 可溶性淀粉制备 待测酶液的制备 加试液反应 吸光度的测定 查表及酶活力的计算 吸光光度法测定耐高温α-淀粉酶活力 （三） 操作流程 1.可溶性淀粉溶液制备：称取绝干淀粉2g，用少量蒸馏水调匀，徐徐倾入已沸的蒸馏水中，加热煮沸至透明，冷却后定容至100ml，此溶液需当天配制。 吸光光