真菌感染与实验室诊断进展(86科室讲).pptVIP

合理判断实验室的结果 ?白色念珠菌是正常寄植菌，其临床意义与监测部位及集落形成的数量有关。粪白色念珠菌计数105cfu/g或尿105cfu/ml为致病性。 ?其他念珠菌、隐球菌、曲霉菌等不属于正常菌群，一旦阳性并排除污染后即有意义。 ?两个或两个以上非相邻解剖部位的播散性念珠菌感染较菌血症的危险性和死亡率均高。 本文档共63页；当前第30页；编辑于星期一\18点2分 呼吸道标本分离到真菌有意义吗? ?这是困扰临床医生的一个难题。 ?分析该真菌的临床价值应该由临床医生和微生物专家共同完成，应结合病人基础病进行分析。 本文档共63页；当前第31页；编辑于星期一\18点2分 气道分泌物中分离出假丝酵母菌意义 ? 人类口腔正常定植菌，正常人20％－55％痰中可分离出假丝酵母菌属 ?假丝酵母菌肺炎少见 – 发病率大约0.23－4.5％ ? 25例ICU患者的尸体解剖研究： – 10例（40％）假丝酵母菌培养阳性 – 只有2例（8％）是真正的假丝酵母菌肺炎 ? 用肺泡灌洗液或毛刷作真菌计数,在24例103cfu/ml无一例是念珠菌感染 ? 实验室报告会增加唑类药物的应用和耐药性。 本文档共63页；当前第32页；编辑于星期一\18点2分 痰和BAL检查的诊断意义 ? 上气道念珠菌定植常见，气道分泌物（痰和BALF）培养阳性不能作为侵袭性感染的证据。 ? EORTC/MSG定义： 痰和BALF中丝状真菌和隐球菌镜检和培养阳性作为感染的微生物学证据，而念珠菌培养阳性（无论3次还是更多）只是定植。 本文档共63页；当前第33页；编辑于星期一\18点2分 镜检和培养方法 ?敏感性低 血培养：在肿瘤和血液病病人中，50%尸检证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。 ?培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区分定植和感染困难 ? 培养时间长 ? 有些标本采集困难 本文档共63页；当前第34页；编辑于星期一\18点2分 近年来诊断的进展？ 胸部CT扫描 Pulmonary CT scan 非培养微生物检查技术 Non-culture based 本文档共63页；当前第35页；编辑于星期一\18点2分 非培养诊断的方法简介 ?真菌细胞壁成分 （1-3）-β- D-葡聚糖检测（G试验） ?真菌抗原检查 半乳甘露聚糖（galactomannan) 抗原（GM) 甘露聚糖(mannan)抗原 隐球菌荚膜多糖抗原（乳胶凝集试验） ?真菌特异的代谢产物（D-阿拉伯糖醇） ?真菌DNA的检测 本文档共63页；当前第36页；编辑于星期一\18点2分 （1-3） - β- D-葡聚糖检测 本文档共63页；当前第37页；编辑于星期一\18点2分 （1-3） - β- D-葡聚糖检测 b1,6 glucans b1,3 PPL bilayer chitin ergosterol b1,3 glucan synthase mannoproteins 真菌细胞壁成份，占50%以上 其他微生物、动物及人的细胞不含该成份 用于侵袭性真菌感染的早期诊断 本文档共63页；当前第38页；编辑于星期一\18点2分 BG检测的特点 ? 可检测多种致病真菌感染 念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞浆菌,毛孢子菌等 ? 阳性结果代表存在侵袭性真菌感染 ? 真菌对数生长期释放量最大 ,可被体内葡聚糖 酶降解。 ? 每周检测2次 本文档共63页；当前第39页；编辑于星期一\18点2分 定量测定1-3-β-D-葡聚糖的设备 MB-80 微生物快速动态测定系统：主机反应器，数据处理分析软件，计算机，打印机，电子恒温加热仪等 本文档共63页；当前第40页；编辑于星期一\18点2分 MB-80 微生物快速动态测定系统 ? 快速定量检测深部真菌和内毒素，帮助临床早期诊断目前常规方法难以确诊的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染 。 ? 可检测标本 ： 血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等 本文档共63页；当前第41页；编辑于星期一\18点2分 定量测定1-3-β-D-葡聚糖的原理 凝固蛋白原 凝固蛋白 动态浊度法 凝固酶 凝固酶原 活化因子G 因子G 1-3-β-D-葡聚糖 全过程2小时内完成，可及时 提供结果，指导临床 本文档共63页；当前第42页；编辑于星期一\18点2分 BG检测用于念珠菌血症 BG检测敏感度明显高于Mannan检测 79.6% vs 42% 阳性早于血培养阳性和临床症状出现 对于念珠菌血症, BG检测是首选检查 Clin.Infect. Dis. 2005.41:654–659. J. C