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中国登革病毒研究进展 病毒登格病毒（dv）属于黄毒科黄色病毒，是目前最重要的昆虫传播病毒。它可引起登革热 (dengue fever, DF) , 登革出血热 (dengue hemorrhagic fever, DHF) 和登革休克综合征 (dengue shock sydrome, DSS) 。全球有2.5亿人正受到感染登革病毒的威胁, 100多个国家有地方性登革热传播, 每年均出现几百万病例, 是个较为严重的公共卫生问题。本文论述了登革热的流行病学概况、分子生物学特征以及实验室诊断和免疫保护方面的国内外研究进展。 1 蚊df流行概况 1.1传播媒介 DF是由蚊媒传播的, 在埃及伊蚊和白蚊体内多次分离出DV1-4型。致倦库蚊也可自然感染DV, 带毒时间可长达29 d, 而且感染后有传播能力, 但比埃及伊蚊和白蚊伊蚊显著为低。 1.2流行概况 1779年世界上首次报道DF在雅加达发生流行, 此后世界各地陆续有DF发生流行的报道。近10年来, DF在世界100多个国家和地区流行, 尤以东南亚为甚, 病人达到6 000万, 死亡3万人。我国最早是1873年在厦门有DF报告, 1940-1945年, DF在东南沿海和长江中下游散发和流行。此后起30多年未发生流行, 直至1978年在广东佛山再次发生DF流行, 波及邻近的7个县市, 流行持续8个月, 患者22 122例, 死亡14例。随后在广东、广西和海南三省间断性流行至今。DV1~4型在我国均发生过流行。 2 dv2型蛋白的结构与免疫特性 登革病毒是有脂质包膜的球形病毒, 有四种血清型 (DV1-4) 。其基因组为单股、正链RNA, 长约11kb, 只含一个长的开放读码框, 编码3个结构蛋白 (C蛋白、prM蛋白、E蛋白) 和7个非结构蛋白 (NS1-NS5) 。基因组的5apos;端和3apos;端都有一个非编码区, 5apos;端还有一个帽子结构。整个基因的编码顺序为: 5apos;-I型帽子结构-非编码序列-C蛋白基因-M蛋白基因-E蛋白基因-NS1基因-NS2a基因-NS2b基因-NS3基因- NS4a基因-NS4b基因-NS5基因-非编码序列-3apos;。 2.1E蛋白 全长500氨基酸左右, N端80%的氨基酸组成膜外区, C端20%的氨基酸构成跨膜疏水区。 E蛋白可分为三个结构区 (DⅠ、DⅡ、DⅢ) , 类似于以前定义的抗原区 (C、A和B)。A区 (包括残基50~130和残基185~300) 是线性的非连续区域, 可刺激病毒中和抗体的产生;B区 (包括残基300~400) 诱导病毒中和抗体和血凝抑制抗体的产生;C区 (约在残基130~185) 是隔断A区的区域, 可被蛋白水解酶降解, 部分表位也可刺激中和抗体的产生。所有黄病毒E蛋白膜外区的氨基酸序列上均有12个严格保守的半胱氨酸残基, 形成6个二硫键。对于DV2型而言, ss1 (cys3- cys30形成二硫键) 稳定氨基端的环, ss2 (cys60-cys121) , ss3 (cys74-cys105) 和ss4 (cys92-cys116) 稳定DⅡ的氨基端部分, 包含氨基酸98和110之间的病毒膜融合序列, ss5 (cys185-cys285) 稳定DⅡ区羧基端的环。ss 6 (cys302-cys333) 是DⅢ区唯一的二硫键。E蛋白能和宿主表面受体相互作用从而在病毒入侵过程中起至关重要的作用。E蛋白还能诱导宿主产生保护性的中和抗体。 2.2C蛋白和preM蛋白 C蛋白为病毒的核衣壳蛋白。preM蛋白是M蛋白的前体, 在病毒成熟过程中经特异性酶切后形成M蛋白, 它能导致病毒感染增强, 并形成病毒的表面结构。 2.3NS1-NS5非结构蛋白 NS1-NS5在病毒复制过程中的作用尚不清楚, 但有资料表明NS1和NS3在病毒免疫反应中起重要作用。NS1免疫小鼠后能诱导产生针对同型DV的保护性抗体。NS3是一种亲水蛋白, 它可能同时具有两种酶活性, 免疫小鼠后能诱导产生保护作用的抗体。 3 邓革命热实验室的诊断与探索 3.1 分离病毒的方法 登革热的病毒血症期很短, 通常在发热前2~3 d到发热开始4~5 d内。因此分离病毒应在发病后的4~5 d内进行。蚊虫接种病毒被认为是最敏感的病毒分离方法, 但由于技术和污染的缘故, 较少被应用。常用细胞培养分离病毒。最常用的细胞系是蚊子卵巢细胞C6/36。乳鼠脑内接种也可用于病毒分离, 但敏感性较差。 3.2 elisa法的诊断意义 传统的血清学方法包括血凝抑制实验 (HI) 、补体结合实验 (CF) 和中和实验。单份血清红细胞凝集抑制效价超过1∶1 280, 补体结合试验效价超过1∶32有诊断意义。双份血清恢复期抗体效价比急性期高4倍以上者可以确诊。中和指数超